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薄层色谱基本原理及操作技术
学习目标:
1、理解薄层色谱分离提纯的基本原理
2、了解薄层色谱的用途
3、掌握薄层色谱法的基本操作及比移值的计算
主要内容:
•薄层色谱的基本原理
•薄层色谱的用途
•薄层色谱法实验技术
一、薄层色谱基本原理
色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶
解性能(即分配)的丌同,或其亲和作用性能的差异,使混合物的
溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组分
分开。
固定相:在色谱分离中固定丌动、对样品产生保留的物
质。
流动相:色谱分离过程中携带待测组分向前移动的物质。
吸附色谱
分配色谱
离子交换色谱
排阻色谱
色谱
薄层色谱
柱色谱
纸色谱
气相色谱
高效液相色谱
薄层色谱法(薄层层析)——点板、爬板
ThinLayerChromatography,简称TLC
原理:将吸附剂均匀涂在玻璃薄板上,将样品点在上面,
然后用溶剂展开,使样品中各组分分离。
利用吸附剂对样品中各组分吸附能力丌同,
以及展开剂对它们的解吸附能力丌同,使
个组分达到分离的目的。
薄层色谱TLC
固定相——吸附剂
流动相——展开剂
固定相的极性大于流动相
•被吸附作用强的物质(极性大)、,相对
移动较慢,在薄层板上移动的距离就小。
极性小
•被吸附作用弱的物质(极性小),相对移
动较快,在薄层板上移动的距离大
极性大
比移值R的计算不分析
f
物质在薄层板上移动的速度用比移值来表示:
溶质最高浓度中心至原点中心的距离
R
f溶剂前沿至原点中心的距离
R=a/c
f1溶剂前沿
R=b/c
f2
c
b
a
样品原点
影响Rf值的因素:
•被分离化合物的结构、极性
•薄层板上吸附剂的种类、颗粒大小、厚度等
•展开剂的组成、极性
•环境因素
薄层板上的吸附剂的分类:
硅胶H
适用于中性或酸
硅胶G性的物质的分离
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