生化技术第二章 离心分离教学课件.pptVIP

生化技术第二章 离心分离教学课件.ppt

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17.蒸馒头时,会看到笼屉周围向外喷出很多白气,这些白气是:( )

A:水蒸气

B:沸腾产生的水蒸气

C:水蒸气遇冷液化成的小水滴

D;是蒸发产生的水蒸气C第二章离心分离借助离心机旋转所产生的离心力,使不同大小和不同密度的物质分离的技术细胞的收集、细胞碎片和沉淀的分离等常用离心分离超速离心技术已成为分离、纯化、鉴别和各种生物大分子的重要手段之一一离心机的种类与用途转速分:常速(低速)、高速和超速1常速离心机8000r/min,R.C.F1*104g用途:分离细胞、细胞碎片、培养基残渣及粗结晶等较大颗粒2高速离心机1*104g~2.5*104r/min,R.C.F1*104g~105g用途:分离各种沉淀物、细胞碎片及较大的细胞器等高速冷冻离心机3超速离心机2.5*104g~8*104r/min,R.C.F5*105g或更高结构:离心管帽、冷冻装置和温控系统、真空系统、安全保护系统、制动系统、指示仪表等。按用途分:制备用超速离心机:分离纯化生物大分子、细胞器和病毒等分析用超速离心机:测定样品纯度(根据紫外吸收率或折光率等判断)、沉降系数、相对分子量沉降系数S:单位离心力作用下粒子的沉降速度,以Svedberg表示,简称S。1S=1*10-13s沉降系数S与分子量M有对应关系,测出离心机转速、离心时间和粒子移动距离,可求出S,再得到M二离心方法的选择对于常速和高速离心机,由于所分离的颗粒大小和密度相差较大,只要选择好离心速度和时间,就能达到分离效果。超速离心的离心方法:差速离心、密度梯度离心和等密度梯度离心1差速离心采用不同的离心速度和离心时间,使沉降速度不同的颗粒分批分离的方法。主要用于分离大小和密度差异较大的颗粒。2密度梯度离心样品在密度梯度介质中进行离心,使沉降系数比较接近的物质得以分离的一种区带分离方法。密度梯度系统:梯度介质有足够大的溶解度,不与分离组分反应,不会引起分离组分的凝集、变性或失活。常用介质:蔗糖、甘油等。样品铺在密度梯度溶液表面,离心后形成若干条界面清楚的不连续区带。3等密度离心当欲分离的不同颗粒的密度范围在离心介质的密度梯度范围内时,不同浮力密度的物质颗粒在离心力作用下一直移动到与各自浮力密度相等的位置(等密度点),形成区带。等密度离心常用的介质:铯盐,如CsCl,Cs2SO4,CsBr三离心条件的确定离心力(转速)离心时间温度pH值思考题1名词解释离心分离相对离心力沉降系数2按离心机转速分,离心机有哪些种类?各自的适用范围是什么?3超速离心方法有哪些?4离心操作应注意控制哪些条件?离心转速和沉降时间有何关系?1.关于沸点,下列说法正确的是()A.任何液体的沸点都是固定不变的B.同一种液体的沸点随液面上气压的升高而降低C.在高山上,随海拔的升高沸点也升高D.不同液体的沸点一般不同D2.在标准大气压下,水温100℃后()A.一定能沸腾B一定不能沸腾C.水继续吸热一定能沸腾D.无法确定C3.水壶中的水沸腾后,仍放在火炉上加热,水壶中水的温度将()A.升高B.不变C.忽高忽低D.降低B4.人们喝开水时,怕水烫嘴,常常向水面吹气,使水凉下来,这是因为()A.向水面吹气吹出二氧化碳有制冷作用B.向水面吹气,可以加快水的蒸发,从而带走较多的热量C.吹出的气体温度比较低,两者混合水就凉了一些B5.下列说法正确的是()A.雾是漂浮在空气中的水蒸气B.露是大量水冰晶吸热熔化成的大量小水珠C.所有气体在温度降到足够低时都能液化D.用压缩体积的办法可以使所有气体液化c6.如图所示,在“观察水的沸腾”的实验中,以下步骤正确的是()(多选)A.把水倒在烧杯里,把温度计穿过纸板插到杯底B.用酒精灯给盛水的烧杯加热C.当水温升到90℃时,每隔1min记录一次水的温度,直到水沸腾后5min为止D.根据记录作出水的沸腾图象BCD7.被100℃的水蒸气烫伤比被100℃的开水烫伤严重的多,这是为什么?解:100℃的水蒸气液化成同温的水要放出大量的热8.下列四个物理事件中,哪一个是利用气体放热来达到目的()A.将液态的铁浇到沙漠中,冷却后得到机械零件的毛坯B.夏天用热毛巾擦身

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