模式生物酵母菌省公开课金奖全国赛课一等奖微课课件.pptx

模式生物--大肠杆菌、酵母菌;大肠杆菌介绍;酵母菌介绍;;大肠杆菌基因组;经过对酵母全基因组序列测定，其基因组大小约为12Mb，初步确定了5885个编码蛋白质基因，140个rRNA基因、275个tRNA基因，第一次揭示了一个真核生物全部基因数目和大致上功效分类.酵母基因组中有快要31％编码蛋白质或者含有开放阅读框，与哺乳动物编码蛋白质基因有高度同源性。;酵母与其它真核生物相比，它们基因组较小（约12Mb），基因数目也比较少（约5885）.与大肠杆菌类似，它们能够在试验室里快速繁殖，在理想条件下，每次细胞分裂大约90min，能够从单个细胞繁殖成克隆群体.酵母作为模式试验系统最主要优点是，酵母细胞不但简单，而且含有全部真核生物细胞主要特征，如含有一个独立细胞核、多条线性染色体包装成染色质、细胞质包含了全部细胞器（如线粒体）和含有细胞骨架结构（如肌动纤维蛋白）等.;大肠杆菌遗传学研究应用;;;;在酵母系统中，单倍体和双倍体细胞存在促进了酵母遗传分析.酵母在单倍体和二倍体状态下均能生长，并能在试验条件下较为方便地控制单倍体和二倍体之间相互转换，这种转换是经过交配（单倍体到双倍体）和孢子生成（双倍体到单倍体）来实现，这对其基因功效研究十分有利.比如，要想知道一个特定基因是否是细胞生长所必需，能够在单倍体里敲除这个基因，单倍体细胞只能承受非必需基因敲除。;酵母中轻易对其基因组做准确人为突变，当把末端与基因组任何一个特定区域同源线性DNA引入到酵母细胞中，酵母基因组就会发生非常高同源重组，造成目标染色体序列被所用目标染色体片段所取代.如准确地删除整个基因编码区、改变单个特定密码子，甚至改变开启子中一个特定碱基对，这使得研究基因或其调控序列功效等详细问题变得比较轻易.;在20世纪60年代末，Hartwell、Hunt和Nurse便认识到用遗传学方法研究细胞周期可能性.Hartwell采取酿酒酵母细胞建立系统模型，经过一系列试验，分离出细胞周期基因发生突变酵母细胞，相继发觉了一系列与细胞周期调控相关CDC基因（celldivisioncyclegenes）。;一个被称为“START”基因对控制各个细胞周期最初阶段含有决定性作用.Nurse在Hartwell基础上，发觉了调整细胞周期一个关键物质CDK（细胞周期蛋白依赖激酶），并证实CDK是经过对其它蛋白质化学作用（磷酸化作用）来驱动细胞周期.鉴于利用酵母分子遗传学对细胞周期调控理论巨大贡献，Hunt、Hartwell和Nurse荣获了21世纪首届诺贝尔生理医学奖.;细胞生命活动中许多过程诸如酶催化代谢反应、信号转导、蛋白质修饰与加工、蛋白质转运等都表现为一个蛋白质与另一个蛋白质间相互作用.传统免疫印迹、Westernblot等方法极难满足对蛋白质分子之间相互作用这一动态过程研究需要.利用酵母转录因子特点，Fields和Song于1989年创建了一个非常简便而有效研究蛋白质相互作用方法———酵母双杂交系统。;酵母双杂交系统;近年来为了适应更广泛用途，在原有酵母双杂交系统基础上发展了大量衍生系统，如蛋白质三杂交系统、激酶三杂交系统、小配体三杂交系统、RNA三杂交系统等类型.另外，还出现了为研究膜蛋白相互作用而改进SOS富集系统（SOSrecruitmentsystem，SRS），在该系统中，蛋白质之间相互作用被人为限制在酵母细胞膜上。;;利用重组大肠杆菌生产人胰岛素;大肠杆菌作为表示外源基因受体菌特征;大肠杆菌作为表示外源基因受体菌特征;蓝白斑筛选;筛选原理;工程菌及载体;α-互补;;;酵母基因工程;;重组菌首先在含有甘油培养基中培养，待甘油耗尽后，加入甲醇诱导乙肝病毒表面抗原多肽（HBsAg）表示，最终S蛋白产量可达细胞可溶性蛋白总量3%在大规模生产过程中，巴斯德毕赤酵母工程菌在一个240L发酵罐中培养，最终可取得90克22nmHBsAg颗粒，足够制成900万份乙肝疫苗。

;酵母菌作为表示外源基因受体菌特征;应用前景;;;