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;目录;
学习目标:
了解培养基的种类,
掌握培养基的组成成分及其作用。;一、培养基的种类
;一、培养基的种类
;基本培养基:主要有MS、White、B5、N6、改良MS、Nitsh、Miller、SH等
完全培养基:就是在基本培养基的基础上,根据试验的不同需要,附加一些物质,如植物生长调节物质和其它复杂有机附加物等。
;①MS培养基:
无机盐、离子浓度高,含高K、N,硝酸盐含量较高,含铵盐
营养丰富
加速合作愈伤组织和培养物生长
②White培养基:
无机盐量较低
使用广泛
适合生根培养、胚胎培养等
;③B5培养基:
含较低的铵,硝酸盐和盐酸硫胺素用量较高
适合双子叶植物,尤其木本植物组培
④N6培养基:
成分简单
硝酸钾和硫酸铵含量高
适合花粉、花药培养
⑤KM-8P培养基:
有机成分复杂
用于原生质体培养(包括原生质融合的培养)
;2、根据培养物的培养过程分;3、根据其作用不同分为
;4、根据其态相不同分;二、培养基成分功能分析;二、培养基成分功能分析;1、无机盐类(即无机营养);(2)微量元素
微量元素——根据国际植物生理学会建议,植物所需元素的浓度小于0.5mmol/l的称微量元素。主要有:铁、铜、锌、锰、钼、硼、碘、钴、氯、钠、镍等。
;2、有机物;(1)碳水化合物
种类:蔗糖或葡萄糖、果糖等。
蔗糖浓度:2-3%,胚培养为4-15%。
作用:
作为离体组织赖以生长的碳源
使培养基维持一定的渗透压(一般在1.5-4.1MPa)
注意:
高压灭菌部分糖会分解
大生产时可用白砂糖
;(2)维生素
种类:VB1、VB6、Vpp、Vc及生物素、叶酸。
浓度:0.1-1.0mg/L
作用:
VB1促愈伤组织产生,提高活力
VB6促根生长
Vpp与代谢和胚发育有关
Vc防组织褐变
;(3)天然复合物
椰乳
是椰子的液体胚乳。它是使用最多、效果最大的一种天然复合物。一般使用浓度在10%—20%,与其果实成熟度及产地关系也很大。它在愈伤组织和细胞培养中有促进作用。使用时注意茎尖大小。
例:在马铃薯茎尖分生组织和草莓微茎尖培养中起明显的促进作用,但茎尖组织的大小若超过1mm时,椰乳就不发生作用。
;香蕉泥
用量为150-200ml/L。用黄熟的小香蕉,加入培养基后变为紫色。对pH值的缓冲作用大。主要在兰花的组织培养中应用,对发育有促进作用。
马铃薯提取液
去掉皮和芽后,加水煮30min,再经过过滤,取其滤液使用。用量为150—200g/L。对pH值缓冲作用也大。添加后可得到健壮的植株。
水解酪(乳)蛋白
为蛋白质的水解物,主要成分为氨基酸,使用浓度为100—200mg/L。受酸和酶的作用易分解,使用时要注意。多用于微茎尖培养。
;(4)肌醇
促进愈伤组织生长、胚状体和芽的形成
对组织细胞繁殖、分化的促进作用
浓度100mg/L
;(5)氨基酸
氨基酸——是蛋白质的组成成分,也是一种有机氮化合物。
常用的有甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、丝氨酸、丙氨酸、半胱氨酸以及酰胺类物质(如天门冬酰胺)和多种氨基酸的混合物(如水解酪蛋白、水解乳蛋白)等。
注意:氨基酸类物质只有在含有无机氮的情况下,对离体组织生长才有较好的效果。
;3、培养体支持材料;4、辅助性物质;5、植物激素;三、植物激素功能分析;三、植物激素功能分析
;2、赤霉素类(GAs)
(1)常用:GA3
(2)作用:促茎伸长,促胚发育成植株;打破休眠;
一般在器官形成后加入。
(3)注意:不耐热。
3、细胞分裂素类(CTK)
(1)常用:6-BAKTZT
(2)作用:诱导不定芽分化和茎、苗增殖。
(3)浓度:0.05-10.0mg/L
(4)注意:ZT不耐热。
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