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维生素的测定
17.2维生素的测定
17.2.1概述[2,3]
维生素广泛存在于各种生物体中,其种类繁多,化学结构与生理
功能各异。因此无法按照结构或功能分类,按其溶解性可分为脂溶性
(V、V、V、V)和水溶性(V、V、V、V、V、V、V)两
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大类。维生素是人体生命活动不可缺少的营养物质,它们一般在动物
和人体内不能合成或合成数量少,满足不了动物和人体的需要,必须
依靠从食物中摄取。在食物中缺乏了任何一种维生素,人和动物都会
发生特有的缺乏症状,如缺乏维生素A、B和C时,可分别引起夜盲
症、脚气和坏血病等,严重时足以致命。某些维生素含量的高低,是
评价农产品品质的重要指标之一。
维生素的分析是一项比较复杂的工作。其样品分析的一般程序是:
①用酸、碱或酶分解样品,使其中的维生素游离出来;②用溶剂进行
提取;③分离干扰物质,对样液进行分离提纯;④用适当的方法进行
定量等。维生素的测定方法,有微生物学测定法、生物学测定法等。
仪器分析的方法有分光光度法、荧光分析法、薄层层析法、高效
液相色谱法等。维生素的分析方法很多,选用方法时应根据样品的品
种、类型、待测维生素的性质、含量以及干扰物质多少等因素来决定。
下面重点介绍维生素C、维生素B和B以及作为维生素A原的b-胡
12
萝卜素的测定。
维生素C又称抗坏血酸,其纯品为白色无臭结晶,熔点为
190~192℃,溶于水或乙醇中,不溶于油剂,在水溶液中易被氧化,
在碱性条件下易分解,在弱酸条件下较稳定。还原型(L-抗坏血酸)可被
氧化为氧化型(L-脱氢抗坏血酸),还有一定的生理作用,如果进一步水
解则生成2,3-二酮古乐糖酸,失去生理作用。总抗坏血酸包括还原型、
氧化型抗坏血酸和2,3-二酮古乐糖酸。
根据它具有的还原性质可以测定V的含量。常用的测定方法有
C
2,6-二氯靛酚法、2,4-二硝基苯肼法、铅-硫化氢法、碘酸法以及荧光
分光光度法。2,6-二氯靛酚法用于测定还原型V,其它方法多用于测
C
定总V的含量。
C
17.2.2还原性维生素C的测定
17.2.2.1方法原理
抗坏血酸(V)结构中有烯二醇结构存在,因此具有还原性,能将
C
蓝色染料2,6-二氯靛酚还原为无色的化合物,V则被氧化为脱氢V,
CC
反应式如下:
还原型V氧化型2,6-二氯靛酚脱氢V还原
CC
型2,6-二氯靛酚(无色)
2,6-二氯靛酚具有酸碱指示及氧化还原指示的两种特性,在碱性
介质中呈深蓝色,而在酸性介质中呈浅红色(变色范围pH4~5),其氧
化态时呈深蓝色(碱介质中)或浅红色(酸性介质),还原态时为无色。根
据这个特性,用碱性蓝色染料的标准溶液滴定植物样品酸性浸出液中
V到刚变浅红色为终点,由染料的用量即可计算V的含量。滴定终点
C
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