2024年度-公开课微生物的实验室培养人教选修.ppt

公开课微生物的实验室培养人教选修

目录

contents

微生物实验室培养概述

微生物营养与培养基

微生物接种与培养技术

微生物分离纯化技术

微生物计数与生长测定

微生物菌种保藏与复苏

实验安全与废弃物处理

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微生物实验室培养概述

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了解微生物的生长繁殖规律

探究微生物的生理生化特性

为微生物的工业应用提供基础数据

促进微生物学领域的研究与发展

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将微生物接种于液体培养基中，通过振荡或静置进行培养。

液体培养

固体培养

半固体培养

将微生物接种于固体培养基表面或内部，通过观察菌落形态和生长情况来判断微生物的种类和特性。

介于液体培养和固体培养之间的一种培养方法，常用于观察微生物的运动性和扩散性。

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无菌器具

如无菌吸管、无菌移液管等，用于取样、接种等操作，保证实验的无菌性。

高压蒸汽灭菌器

对培养基、器皿等进行灭菌处理，保证实验的准确性和可靠性。

显微镜

观察微生物的形态和结构，判断其种类和特性。

无菌操作台

提供无菌操作环境，避免杂菌污染。

恒温培养箱

提供适宜的温度和湿度条件，促进微生物的生长繁殖。

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微生物营养与培养基

碳源

氮源

无机盐

生长因子

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提供微生物细胞合成所需的碳元素，如葡萄糖、蔗糖等。

提供微生物合成蛋白质、核酸等含氮物质的原料，如铵盐、硝酸盐等。

维持微生物细胞渗透压、酸碱平衡以及酶活性，如磷酸盐、硫酸盐等。

某些微生物生长所必需的微量有机物质，如维生素、氨基酸等。

天然培养基

成分不确定，如麦芽汁、牛肉膏蛋白胨培养基等。

合成培养基

成分明确，根据微生物营养需求设计，如MS培养基、查氏培养基等。

选择性培养基

加入某种试剂或化学物质，依据微生物的某种特性进行选择培养，如伊红美蓝培养基用于筛选大肠杆菌。

按照一定比例称取各种成分，混合均匀后调节pH值至适宜范围。

培养基配制

采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法等方法对培养基进行灭菌处理，以消除杂菌污染。在配制过程中要注意避免产生沉淀或分层现象，确保培养基成分均匀分布。同时，根据微生物的不同需求，可以选择添加适当的抗生素、抗氧化剂等物质以提高培养效果。

培养基灭菌

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微生物接种与培养技术

通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。

平板划线法

将骏业进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

稀释涂布平板法

用接种针将菌种穿刺接入半固体培养基中，此法用于观察细菌的运动能力和保藏菌种。

穿刺接种法

pH值

微生物的生长还需要适宜的pH值。不同种类的微生物对pH值的要求不同，因此在实验室培养中需要选择合适的缓冲液或调节剂来控制pH值。

温度

微生物的生长需要适宜的温度，不同种类的微生物对温度的要求不同。在实验室培养中，一般通过恒温培养箱或水浴等方式控制温度。

湿度

湿度对微生物的生长也有重要影响。在固体培养基上培养微生物时，需要保持一定的湿度，以利于菌落的生长和繁殖。

光照

某些微生物的生长需要光照，而另一些则不需要。在实验室培养中，可以通过控制光照时间和强度来满足不同微生物的需求。

通过观察菌落的大小、形状、颜色、透明度等特征来判断微生物的种类和生长情况。

菌落形态观察

通过定期测量微生物的生长量（如菌落直径、菌液浓度等），绘制生长曲线，了解微生物的生长规律和特点。

生长曲线测定

检测微生物代谢产生的物质，如有机酸、酒精、抗生素等，以了解微生物的代谢类型和产物特点。

代谢产物检测

通过一系列的生理生化试验，如糖发酵试验、蛋白质分解试验等，进一步了解微生物的生理特性和分类地位。

生理生化试验

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微生物分离纯化技术

通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。

原理

灭菌接种环、取菌种、连续划线、培养观察。

操作步骤

操作简单，但易产生杂菌污染，分离效果相对较差。

优缺点

操作步骤

制备稀释液、涂布平板、培养观察。

原理

将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

优缺点

能够分离得到单菌落，但操作相对复杂，且对菌液的浓度有一定要求。

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利用液体培养基对微生物进行增菌培养，然后通过离心、过滤等手段将微生物分离出来。

液体培养基分离法

利用选择性培养基对特定种类的微生物进行筛选和分离，如利用高盐培养基分离耐盐微生物。

选择性培养基分离法

在显微镜下直接对微生物进行观察和操作，如利用显微操作器对微生物进行单细胞分离。

显微操作法

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微生物计数与生长测定

原理

利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。

缺点

不能区分死菌和活菌。

优点

直观、快速。

注意事项

保证计数室清