44放射性同位素标记抗体及其制备.ppt

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放射性同位素标记抗体及其制备免疫放射分析(IMRA),是一种用放射性同位素标记抗体的新的分析技术,具有高度敏感性、精确性和特异性。放射性同位素标记抗体指放射性同位素与抗体结合形成的结合物。目前多使用同位素碘作标记,125I半衰期较长(60天)、同位素丰度大、辐射损伤小和计数率较高。放射性同位素标记抗体及其制备放射物标记中最常用的是外标记,碘标记的方法很多,最常用氯胺T法,抗体IgG比较稳定,碘化后架存期较长。放射性同位素标记抗体及其制备碘化IgG程序(1)先将提纯的免疫抗体IgG与同位素125Ⅰ置试管中(2)再加入氯胺T。由于碘化反应进行很快,故碘及氯胺T必须在搅拌下加入,以免碘化不均匀.放射性同位素标记抗体及其制备(3)约5min后加入还原剂偏重亚硫酸钠,阻断氯胺T作用以终止碘化反应,再加入碘化钾作为碘离子的载体,以减少蛋白分子吸附试剂中数量不稳定的放射性碘离子。放射性同位素标记抗体及其制备(4)最后用过葡聚糖G50柱等方法将游离碘及其他放射性杂质与标记抗体分开。

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