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SDS凝胶配制：先配分离胶，再配浓缩胶。配制分离胶：加入TEMED
后立即摇匀灌入1.5mm玻璃板；用枪吸取1ml胶沿玻璃侧壁放出，防止气泡；
然后胶上加一层去离子水，凝得更快。当水和胶中间有一条折线时，说明胶已凝
固(约20min)。倒去胶上的水，用蒸馏水洗涤2次，适当晾干。配制浓缩胶：加次，适当晾干。配制浓缩胶：加
入TEMED后立即摇匀灌胶(至小玻璃板上缘1mm处)；将梳子(10(10孔蓝梳子，
1.5mm)水平插入浓缩胶中(梳子保证干净且干燥)。待浓缩胶凝固后(约20min)，
用笔在浓缩胶和分离胶之间做一记号；进行下一步电泳，或用保鲜膜
包裹保存于4℃。分离胶、浓缩胶配方如下：
12%分离胶(ml)5%浓缩胶(ml)
双蒸水1.92双蒸水2.7
30%Acr-Bis(29:1)2.430%Acr-Bis(29:1)0.67
1.5MTris(pH8.8)1.561MTris(pH6.8)0.5
10%SDS0.0610%SDS0.04
10%APS0.0610%APS0.04
TEMED0.0024TEMED0.004
SDS凝胶电泳：将凝胶玻璃板固定于电极架，放入电泳槽中的固定架
(小玻璃板朝内，卡紧；若只跑一块胶，槽的另一边垫一块塑料板)；在上下槽内
加入1×电泳缓冲液(上槽内的电泳液应没过小玻璃板上缘上槽内的电泳液应没过小玻璃板上缘3-5mm3-5mm；下槽内的电泳
液应没过金属丝，水位低于大玻璃板上缘3-5mm，内液高于外液，排除凝胶底
部两块玻璃板之间的气泡；两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出。上
样：用移液枪将样品吸出，将枪头插入上样孔中加入样品；为避免边缘效应，最
好选择中间孔上样，其余孔加1×LB(10μl)(与上样体积相一致，用RIPA裂解液稀
释5×LB)。电泳：将电泳槽与电泳仪相接(电极盖一定要盖严，正负极相对应)(一
旦接通电源，内槽会出现许多细密的小泡；若没有，重新检查装置)；跑浓缩胶
时70V(约30min)，分离胶，分离胶100V(约90min)；溴酚蓝刚跑出即可终止电泳。
SDS凝胶配制：先配分离胶，再配浓缩胶。配制分离胶：加入TEMED
后立即摇匀灌入1.5mm玻璃板；用枪吸取1ml胶沿玻璃侧壁放出，防止气泡；
然后胶上加一层去离子水，凝得更快。当水和胶中间有一条折线时，说明胶已凝
固(约20min)。倒去胶上的水，用蒸馏水洗涤2次，适当晾干。配制浓缩胶：加次，适当晾干。配制浓缩胶：加
入TEMED后立即摇匀灌胶(至小玻璃板上缘1mm处)；将梳子(10(10孔蓝梳子，
1.5mm)水平插入浓缩胶中(梳子保证干净且干燥)。待浓缩胶凝固后(约20min)，
用笔在浓缩胶和分离胶之间做一记号；进行下一步电泳，或用保鲜膜
包裹保存于4℃。分离胶、浓缩胶配方如下：
12%分离胶(ml)5%浓缩胶(ml)
双蒸水1.92双蒸水2.7
30%Acr-Bis(29:1)2.430%Acr-Bis(29:1)0.67
1.5MTris(pH8.8)1.56
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