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植物组织培养:指在无菌和人工控制的环境条件下,利用人工培养基,对离体的植
物胚胎、器官、组织、细胞原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。又称
为植物离体培养
离体生态学:指研究离体培养环境条件控制的科学,其研究对象培养基、植物材
料和人工环境条件
外植体:用于离体培养的那部分植物器官、组织或细胞
愈伤组织(callus):指外植体因受伤或在离体培养时,其细胞进行活跃的分裂增
殖而形成的一种无特定结构和功能的组织
植物组织培养的特点
1.组培技术无菌操作技术。
2.组培材料处于完全的异养状态。
3.组培材料可以离体状态的器官、组织、细胞或原生质体。
4.组织培养物可以形成克隆(clone,无性繁殖系),也可以进行茎芽增殖或生根
5.组培容器内的气体和环境气体可通过封口材料进行交换,相对湿度通常几乎
100%,因此,组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质层,且气孔保卫细胞功能缺乏,气
孔始终都张开的。
6.组培的环境温度、光照强度和时间都人为设定的,其参数可调
植物组织培养的研究类型
组织培养
器官培养
胚胎培养
细胞培养
原生质体培养
植物组织培养的研究任务
研究离体培养条件下,细胞、组织或器官所需营养条件和环境条件,细胞、组织或器
官的形态生和代谢规律,植物脱毒方法和机理,植物特别一些难繁植物的大量快速繁
殖方法,细胞融合方法和机理,再生个体的遗传和变异,种质资源的离体保存机理和方法
等
德国植物学家Schleiden和动物学家Schwann于1838-1839年提出的细胞学说
德国植物学家Haberlandt于1902年提出了植物细胞具有全能性
李继侗和沈同1933年成功培养了银杏的胚。
1952年,Morel和Martin提出了植物脱毒(virusfree)技术
Guha和Maheshwari等——花药培养
Cocking等-原生质体培养
Carlson等——原生质体融合
植物组织培养的应用
快繁和脱毒
育种
次生代谢物生产
种质保存
在遗传、生理、生、病理等研究上的应用
离体快繁(试管苗和人工种子)
试管苗特点
繁殖系数大、速度快,苗木整齐一致,周年生产
人工种子
指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳
和人工种皮中,从而形成能芽出苗的颗粒体。
具有试管苗的优点外,还具有以下优点:
1)便于贮藏和运输、可直接播种和机械操作;
2)可在人工种子中加入抗生素、菌肥、农药等成分,提高种子活力和品质
培育新品种或创制新物种
单倍体育种
离体选择突变体
培育远源杂种
基因工程育种
单倍体育种
手段:花药和花粉培养
优点:所有基因均能表现,基因型可快速纯合
成果:已育成大面积种植的品种
离体选择突变体
手段:愈伤组织、悬浮培养细胞易变异、细胞数量大,有利于突变体筛选
优点:多用于抗性筛选
成果:已选出一些抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白的突变体,有些已用于生产
培育远源杂种
胚培养可克服受精后障碍导致的远源杂交不孕,产生远源杂交后代,育成新物种.苹果,
梨,大白菜和甘蓝、栽培棉和野生棉
原生质体融合可克服有性杂交不亲和性,获得体细胞杂种.马铃薯和番茄、烟草和龙葵
基因工程育种
农杆菌介导法、基因枪法均基于植物组织培养技术。
抗除草剂、抗虫、抗病、抗逆性、品质改良
次生代谢物生产:利用组织和细胞的大规模培养,可以生产人类需要的一些天然有机
合物
植物种质资源的离体保存
优点:节约人力、物力和土地,防止有害病虫的传播,便于种质资源的交换和转移
培养基的成分
水
矿质元素
碳水合物
生理活性物质
生长调节剂
附加物
天然添加物
水
水质软装置
离子交换
反向渗透蒸馏
矿质元素
大量--氮、磷、钾、钙、镁、硫
微量--铁、锰、硼、锌、铜、钼
碳水合物
作用:提供碳源、维持渗透压
通常碳源用蔗糖
低浓度(1.5~2.5%)的糖有利于木
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