微生物工程(发酵)第三章 培养基制备与灭菌.pptx

第三章培养基制备与灭菌本章将详细介绍培养基的制备方法以及相关的灭菌技术。我们将探讨培养基的定义和组成成分，并学习如何通过标准步骤配制培养基。此外,我们还将介绍灭菌的几种常见方法,包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌、过滤灭菌和化学灭菌。

培养基的定义与作用培养基是一种人工合成或经过处理的物质,为微生物的生长和繁衍提供营养物质和生存环境。它是微生物分离培养、鉴定和培养基础研究的基础。培养基的组成可根据微生物的营养需求而设计,具有重要的应用价值。

培养基的主要成分培养基的主要成分包括碳源、氮源、矿物质、维生素和水。碳源通常是葡萄糖或其他糖类,为微生物提供能量。氮源可以是蛋白质、氨基酸或无机盐,为细胞生长和复制提供基础。矿物质和维生素则是微生物生长所需的微量元素和辅助因子。这些成分共同构成了培养基的营养环境,支持微生物的生长繁衍。

培养基的配制方法培养基的配制是一个标准化的过程,需要遵循特定的步骤。首先根据配方称取各种成分,如蛋白质、碳水化合物、矿物质等。然后将它们溶解于纯净水中,充分搅拌混合均匀。接下来进行pH值调整,确保培养基达到最适合微生物生长的酸碱度。最后进行灭菌处理,确保培养基无污染。

培养基的配制步骤1称取成分根据配方配比,精准称取所需的各种营养成分,如蛋白质、糖类、矿物质等。2溶解混合将称好的成分加入纯净水中,充分搅拌混合至完全溶解均匀。3pH调整测量培养基的pH值,必要时进行酸碱调整,确保培养基达到微生物最佳生长pH范围。4灭菌处理将配制好的培养基进行高压蒸汽或其他灭菌方式处理,确保培养基无任何污染微生物。

培养基的灭菌方法高压蒸汽灭菌法：通过高温高压下的水蒸汽作用,可有效杀灭培养基中的所有微生物。这种方法简便高效,是最常用的灭菌手段。干热灭菌法：以高温烘烤的方式消除培养基中的微生物污染。适用于一些不耐高温水蒸汽的热敏性物质。过滤灭菌法：利用细小的孔隙过滤膜阻挡微生物进入培养基,达到无菌状态。常用于热敏性物质或需保留某些成分的培养基。化学灭菌法：采用酒精、戊二醛等化学药品杀灭培养基中的微生物。适用于无法高压或高温灭菌的特殊培养基。

高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法是最常用和有效的培养基灭菌方式。在高温高压的水蒸汽作用下，可快速杀灭培养基中的所有微生物污染。这种灭菌过程简单快捷,通常能保证培养基无任何细菌或真菌残留。

干热灭菌法干热灭菌法是通过高温烘烤的方式来消除培养基中的微生物污染。这种方法适用于无法承受高温水蒸汽的一些敏感性物质。在特殊的烘干设备中,培养基会被加热到200℃以上的高温,在较长时间的作用下可以有效杀灭所有细菌、病毒和真菌。相比之下,这种灭菌过程较高压蒸汽法更为缓慢和费时,但对某些热敏培养基来说是理想的选择。

过滤灭菌法过滤灭菌是一种利用细小孔径的过滤膜阻挡微生物进入培养基的方法。这种方法适用于那些对热敏感或需要保留某些成分的培养基。过滤膜上的微孔可以有效截留细菌、真菌等微生物,从而达到培养基无菌的状态。相比于高压蒸汽和干热灭菌,过滤法的优点是不会破坏培养基的成分。

化学灭菌法化学灭菌法利用一些特殊的化学药品来杀灭培养基中的微生物。这种方法适用于无法用高温或过滤等手段进行灭菌的培养基。常用的化学灭菌剂包括乙醇、戊二醛等,它们可有效破坏微生物的细胞结构和代谢功能。这种方法简单高效,但需要严格控制化学药品的用量和接触时间,以确保培养基完全无菌。

培养基的储存合理储存培养基对于维持其优良性能非常重要。培养基应置于阴凉、干燥的环境中,避免光照和温度波动。对于易受潮的培养基,应采用密封容器保存。定期检查培养基外观和pH值,确保其质量符合要求。

培养基的质量控制培养基的质量控制是确保实验结果可靠的关键环节。从配制、灭菌到储存各个步骤都需要严格把控,确保培养基的理化性质、营养组成和无菌状态符合要求。定期检查培养基外观、pH值、离子浓度等理化指标,确保其性状稳定采用标准菌株进行生长性能测试，评估培养基是否能够支持微生物正常生长建立培养基质量标准和检测制度，建立出入库和使用记录，确保可追溯

培养基的配制注意事项严格控制原料配比,确保营养成分的适度平衡。认真检查pH值,根据微生物需求进行精准调控。确保充分溶解混合,避免出现颗粒或浑浊情况。灭菌过程要彻底,确保培养基达到无菌标准。妥善保存培养基,避免受热、光照及其他污染。定期检测培养基性状,确保质量符合要求标准。

常见培养基类型及应用细菌培养基专门用于培养细菌的营养丰富培养基,包括肉汤培养基、琼脂培养基等。适用于大多数细菌的常规培养和鉴定。真菌培养基针对真菌生长需求而设计的培养基,如马铃薯葡萄糖培养基、Sabouraud培养基等。可促进真菌菌落形成和孢子发育。兼性培养基既能培养细菌又能培养真菌的通用性培养基,如营养琼脂、TSA培养基。适用于多种微生物的初次分离和鉴定。富集培养基根据微