植物蛋白质的提取.pptxVIP

种子生产与经营专业教学资源库;主要内容;一、实验目的

熟悉植物蛋白提取原理和方法，了解其意义及其应用价值。;二、实验原理

植物蛋白要尽可能提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失；减少对蛋白质的人为修饰；破坏蛋白与其他生物大分子的相互作用，并使蛋白质处于完全变性状态。;三、实验材料

（一）实验材料

植物新鲜叶片组织。

;三、实验材料

（二）实验试剂

1、20mL样品提取缓冲液：

2.5mL0.5mol/LTris-HCl；1.0mL1%SDS；2.0mL100%甘油；1.0mL100%β-巯基乙醇，加双蒸水定容至20mL。

2、10mL上样缓冲液：

1.25mL0.5mol/Ltis-Hcl；1.0mL100%甘油；0.5mL100%β-巯基乙醇，加双蒸水定容至10mL。

3、-20℃下预冷丙酮。;三、实验材料

（三）实验仪器

离心机、移液器、研钵、离心管等。;四、实验步骤

（1）取0.3g左右的植物叶片，加入4mL提取缓冲液和适量石英砂，色素多的可按材料鲜重的10%加入PVP。

（2）在研钵中研磨充分后转入10mL离心管中，摇匀并放在4℃条件下提取0.5h，充分溶解蛋白。

（3）4℃6000r/min离心10min，