动物实验设计.doc

实验设计大纲

实验名称：肾前性急性肾功能衰竭模型复制及解救

课题来源：自选

设计班级：检验医学院医学2018级检验一班

设计人员：**

设计日期：2010年11月10日

指导老师：**

实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路。

目的与意义。

学习用去甲肾上腺素复制肾前性急性肾功能衰竭模型，

观察该模型一般状态下、尿蛋白及尿沉渣尿素氮、肌酐水平、内生肌酐清除率等变化

测出用多巴胺解救的浓度及用量

国内外研究现状

未知

存在的问题

不知道多巴胺的最佳用量是多少，大剂量多巴胺可使肾血管明显收缩

解决问题的思路

剂量过大或滴注过快可出现心动过速、心律失常和肾血管收缩导致肾功能下降，一旦出现以上反应，就应减慢滴注速度或停药。可根据心率及心律来判断是否停药

参考文献

主编.金惠铭王建枝书名：病理生理学（第7版）人民卫生出版社.251至257页

主编.杨宝峰书名.药理学（第7版）.人民卫生出版社.87至92页

3．主编.杨芳炬书名.机能实验学.高等教育出版社.194至196页

实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题,实验动物设计,实验专业设计，实验统计设计,实验方法设计，可行性分析,预期结果，实验设计工作时间安排）。

实验设计目标

利用去甲肾上腺素复制急性肾功能衰竭，观察是否有肾实质性病变

用多巴胺解救肾衰，看其效果如何

拟解决的关键问题

控制去甲肾上腺素及多巴胺的量，注意心率及心律的变化

实验设计

实验专业设计

去甲肾上腺素能激动a1受体，使血管收缩，滴注时间过长或剂量过大，可是肾脏血管剧烈收缩，引起肾有效循环血量减少，导致肾血液灌流量和GFR显著降低，出现尿量减少和氮质血症等

多巴胺在低浓度时作用于D1受体，是通过激活腺苷酸环化酶，是使细胞内cAMP水平提高而导致血管舒张。使肾血管舒张，肾血流量增加，肾小球率过滤也增加

实验动物设计（遗传背景，微生物质量控制，育种繁殖，饲养管理，动物模型，实验动物学技术）

实验动物的选择：家兔

遗传背景：近交系

微生物质量控制：清洁动物

饲养管理：全价饲料喂养

动物模型：肾前性急性肾功能衰竭

实验方法设计

实验技术路线：复制急性肾衰模型

检验该模型的尿常规及肌酐清除率等指标，与对照组比较

输注低浓度多巴胺后测其尿常规及肌酐清除率等指标

实验技术方法

实验分组：实验组（去甲肾上腺素导致的急性肾衰的家兔）、对照组（注射生理盐水的家兔）

模型复制：

一、实验前24h，取健康家兔两只，称重后进行一下处理：

实验组：静脉滴注去甲肾上腺素50ug溶于于100ml生理盐水中（40滴/分钟）

对照组：静脉滴注0.9%生理盐水（30滴/分钟）100ml

二、24h后，捉拿家兔，称重病麻醉（耳缘静脉注射1.5%戊巴比妥钠2ml/kg。麻醉后将家兔固定于兔台，导尿管导尿，收集尿液，留作尿蛋白、尿液肌酐浓度测定

三、颈部剪毛，作颈部切口，分离一侧总动脉，作颈动脉插管以备取血用，分离另一侧颈静脉，作颈静脉插管后，输入5%葡萄糖（100ml/kg速度为50滴/min）,以保证有足够尿量，自输液开始记录一小时尿量。

四、颈总动脉放血5ml,离心（2500r/min,10min），取血清待测定尿素氮、肌酐含量。实验组和对照组对比

五、从耳缘静脉输注多巴胺（每分10ug/kg）,直到出现心率加快，停止。测此时尿液肌酐浓度

5．实验结果：检测实验组于对照组的血肌酐，尿素氮等，比较，看急性肾衰是否复制成功，输入多巴胺溶液后，实验组家兔的血肌酐和尿素氮等于输入多巴胺前的对比，看多巴胺对急性肾衰的治疗效果

实验设计工作时间安排

实验前24h制造模型，实验可能用150分钟

完成实验的条件

仪器设备：哺乳动物手术器械，分光光度计，离心机，水浴锅，显微镜，中试管，塑料输尿管，酚红标准管

药品试剂：去甲肾上腺素，多巴胺，1.5%戊巴比妥钠，血肌酐测定试剂，，血液尿素测定试剂，5%葡萄糖溶液，生理盐水，0.6%酚红溶液，3%NaOH溶液，20%葡萄糖溶液，10%NaOH溶液，5%醋酸溶液，0.1mol/LHCL溶液，蒸馏水