一株益生性植物乳杆菌的体外安全性评价.pdfVIP

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一株益生性植物乳杆菌

的体外安全性评价

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止矿牛酸乳是青藏高原地区的人们经常食用的乳制品，(3)有害代谢产物试验。一是氨基酸脱羧酶检测。

叶七只有了解该地区优势乳酸菌的安全性，才能更好的菌种活化后分别在添加了前体氨基酸的氨基脱羧酶筛选培

对其进行开发利用。本试验所采用的植物乳杆菌11是分离养基和未添加前体氨基酸的培养基划线，300C恒温培养24h

自西藏地区的自然发酵牦牛乳，前期经本实验室测定益生和48h，观察培养基的颜色变化。二是偶氮还原酶的测定。

性良好，现通过体外安全评价来评定其安全性，包括溶血将活化后的实验菌株涂布于含有直接蓝71的琼脂培养基上

试验、明胶液化试验、有害代谢产物测定和耐药性评价试(5mg／L)，30％恒温培养72h，观察是否有水解圈产生。

验，旨在为其作为益生菌应用提供依据。三是吲哚实验。以1％接种量将活化后的实验菌株接种于蛋

白胨水培养基中，300C恒温培养48h，加入吲哚试剂观察颜

一、材料与方法色变化。以大肠杆菌ATCC8099为阳性对照菌株，以蛋白胨

1．材料。实验菌株是植物乳杆菌11(Lac￡D6acj，』us水培养基为空白对照。

(4)耐药性评价。药敏试验按照美国临床和实验

plantarum)，质控菌株大肠杆菌ATCC8099、金黄色葡萄球

and

菌ATCC25923购自中国科学院微生物研究所。室标准协会(ClinicalLaboratory

2．方法。(1)溶血试验。菌种活化后划线接种于哥

试验，以CLSI2020一M100第30版公布的数据作为标准，

伦比亚血平板上，300C恒温倒置培养48h，观察记录菌

落周围的变化情况，以具有溶血性质的金黄色葡萄球菌判定该药物对肠球菌是耐药(R)、中介(I)或是敏感

ATCC25923作为阳性对照。(S)。

(2)明胶液化试验。将活化后的菌株穿刺接种于5mL(5)数据处理与分析。试验均重复3次，数据以均值

±标准差表示，采用Excel2010和SPSS20．0进行数据分析。

明胶培养基中，300C恒温培养48h后，置于4。C条件下，使

培养基完全凝固。将生理盐水穿刺于明胶培养基中，作为

阴性对照。二、结果与分析

1．溶血试验结果。如图1所示，阳性对照金黄色葡萄球

菌菌落周围出现了透明圈，发生了B一溶血；实验菌株周

围无溶血环出现，为1一溶血，即不溶血。

(A：金黄色葡萄球菌，B：植物乳杆菌11)

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万方数据

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2．明胶液化试验结果。实验菌株没有使明胶固体培养三、结论与讨论

基表面发生液化，表现为阴性。乳酸菌或有潜在的安全性问题，因此需确定菌株的

3．有毒代谢产物试验结果。第一，实验菌株在空白实耐药性等问题。研究发现，大多数革兰氏阳性菌对阿奇霉

验和添加L一酪氨酸、L一组氨酸、L一赖氨酸和L一鸟氨酸素、红霉素类药物敏感，链霉素与青霉素使用广泛，耐药

的平板颜