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ABO血型鉴定

【注意事项】

严格按操作规程操作，认真核对标本并做好标记。

所用试管、滴管和玻片必须清洁干净，防止溶血。

一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。

抗血清每次使用完后，应放回冰箱保存，以免细菌污染。

为了防止冷凝集现象的干扰，一般应在室温下进行试验。

严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。

观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。

未用的微柱凝胶免疫检测卡应人室温保存，用完后放4℃冰箱保存1周。

观察结果时，若出现溶血现象，表明存在抗原抗体反应并有补体激活，应视为凝集。

判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。

分型试剂+受检者红细胞与受检者血清+试剂红细胞结果不符时，要看受检者基本情况，如果是婴幼儿、肿瘤患者，理论上应该检测到的抗体没有查到，可以忽略不计，以查到的抗原定型。

分型血清+受检者红细胞与受检者血清+试剂红细胞结果不符时，受检者基本情况，又不是婴幼儿、肿瘤患者。理论上应该检测到的抗体没有查到，多见老年人，可以用以下方法加以检测抗体：

用试管法重做，在做完1、2步后，把试管放4℃环境15分钟，后取出离心，观察

结果。

用试管法重做，在做完1、2步后，把试管放37％环境15分钟，后取出离心，观察结果。

用试管法重做，用聚凝胺方法查抗体：①取洁净小试管3支，分别标明A型、B型和O型细胞。用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B、O型5％试剂红细胞悬液1滴，混匀；②于三个试管中分别加入低离子强度液(lowionstrengthsolution，LISS液)0.7ml、聚凝胺液(polybrenesolution)2滴，混匀；③1000r/min离心(离心时间应按离心机校准时间)；④倒掉上清液，管底残液体留约0.1m1；⑤轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做；

⑥加入解聚液(resupensionsolution)2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。

如果在30秒至1分钟内凝集散开，代表是由聚凝胺引起的非特异性聚集；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应。如反应可凝，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

受检者血清+试剂红细胞试验中，O型细胞凝聚要查自身抗体和不规则抗体。

【临床意义】

血型鉴定是实施输血治疗的首要步骤。进行交叉配血前必须准确检测受血者和供血者的血型。

进行组织器官移植时，供、受器官者的ABO系统血型必须相同。

母、子ABO系统血型不合可以造成ABO系统新生儿溶血病。

查抗体的目的在于复检血型抗原结果的准确性，纠正漏检、误报。

查抗原时，对一些具有弱抗原的亚型，如AB型，因其A型抗原较弱而被忽略，误

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定为B型。通过查抗体可发现此类患者血清中既无抗A，也无抗B凝集素，提示检

查的抗原可能有误，应进一步核实鉴定结果。

查抗体可以纠正某些肿瘤患者因红细胞抗原性减弱造成的抗原检测错误，同时还可以克服和排除获得性类B抗原和全凝集现象对红细胞定型的干扰。

查抗体还可以发现血清中存在的一些不规则抗体，如抗M、抗N、抗P、抗Lewi等。

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Rh（D）血型鉴定

【注意事项】

Rh血型系统的抗体多由免疫产生，血清中有很多天然抗体存在，故不需作抗体检测试验。

阳性对照，取3人O型红细胞混合配成。阴性对照不易得到，一般配制方法为正常人AB型血清1滴，5％D阳性红细胞悬液1滴和菠萝酶试剂1滴混匀，与受检管一同置于37℃水浴1小时。

酶介质中的酶很容易失活，故每次试验都要设置阳性对照。若阳性对照不出现凝集，

表明酶或抗血清已失效，酶的活性过强也可使阴性标本出现假阳性结果，因而也要设立阴性对照，以排除假阳性。

Rh血型鉴定要严格控制温度与时间，因Rh抗原、抗体凝集反应的凝集块比较脆弱，观察反应结果时，应轻轻弹动试管，不可用力摇动。

Rh(D)抗原检测原则 对受血者一般只测Rh(D)抗原，而对供血者不仅要检查Rh(D)

抗原，并在其为阴性的前提下，必须进一步确定是否为Rh弱D型。

【方法评价】

单克隆混合试剂可特异性地与含D抗原的红细胞发生凝集反应，能检出过去认为是阴性的弱D表现型，其中包括极罕见Dvariant型。

酶介质法用于Rh血型系统抗原检测或其IgG类相应抗体的检测。在ABO、P

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和Lewi血

型系统抗原抗体反应中，可用酶介质加强其反应强度。但酶介质可破坏MNSs和Duffy血型

系统抗原，因而不能用此法进行MN和Duffy血型系统抗原抗体检测。

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