GABA信号途径参与树突状细胞的抗原递呈及其在DSS诱导的结肠炎中的作用中期报告.docxVIP

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GABA信号途径参与树突状细胞的抗原递呈及其在DSS诱导的结肠炎中的作用中期报告

一、研究背景和意义

树突状细胞(dendriticcell,DC)是一类重要的抗原递呈细胞,能够识别和捕获外来抗原,通过稳健的生物学过程对其进行加工,最终呈现给T淋巴细胞,启动免疫应答的过程。GABA是一种重要的神经递质,在中枢神经系统中扮演着抑制神经元活动的作用。近年来的研究表明,GABA也能作用于免疫细胞,影响免疫应答的过程。然而,GABA在DC抗原递呈过程中的作用仍不清楚。因此本研究旨在探讨GABA信号途径在DC抗原递呈及DSS诱导的结肠炎中的作用,为深入了解GABA在免疫调节中的作用提供理论基础和实验依据。

二、实验设计与方法

1、动物模型及处理:采用C57BL/6小鼠作为实验对象,随机分为3组:对照组、DSS组、GABA组,每组10只。对照组仅饮用纯净水,DSS组和GABA组在给予DSS溶液诱导结肠炎的同时,DSS组注射生理盐水,GABA组注射GABA(2mg/kg)。

2、组织采集与处理:在炎症响应达到巅峰时第8天采集小鼠结肠组织,制备单细胞悬液,使用流式细胞术分离DC。

3、免疫细胞分离及诱导:使用CD11c微珠分离CD11c+DC,分别共培养T细胞(Tcell)/DC,CD4+T细胞和CD8+T细胞,并检测细胞的分化及合成程度。

4、检测指标:采用实时荧光定量PCR检测T细胞极化相关基因mRNA表达的水平(包括IL-4、IL-17、T-bet、GATA3等),并使用流式细胞仪记载T细胞的表面标记物表达(包括IFN-γ、IL-4、IL-17等),以及测定炎症细胞浸润及浸润程度。

三、预期结果与贡献

预期结果:相较于DSS组,GABA组分泌IL-4和IL-17的CD4+T细胞数量有所增加,建立在DC基础上的引发T细胞免疫应答的系统也更加活跃,而产生IFN-γ的CD8+T细胞没有明显变化,说明GABA能促进T细胞在结肠炎中的免疫反应,加深我们对GABA在免疫调节中的作用的认识。

贡献:我们的研究将会为免疫治疗中使用GABA提供有效的实验数据和科研依据,同时也为GABA在DC抗原递呈及免疫调节中的作用提供了更为深入的探索,并为相关领域的研究工作提供帮助。

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