魏培海仪器分析高效液相色法.pptVIP

吸附系数Ka与组分的性质、吸附剂的活性、流动相的性质及温度有关。吸附平衡Xm+nYa→Xa+nYm第64页,共79页，星期六，2024年，5月二、液-液分配色谱固定相与流动相均为液体（互不相溶）基本原理：组分在固定相和流动相上的分配；流动相：亲水性固定液—疏水性流动相疏水性固定液—亲水性流动相固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用化学键合固定相：将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上。第65页,共79页，星期六，2024年，5月正相色谱——固定液极性流动相极性分离顺序：极性小的组分先出柱；极性大的组分后出柱。分离对象：适于分离极性组分反相色谱——固定液极性流动相极性分离顺序：极性大的组分先出柱；极性小的组分后出柱。分离顺序：适于分离非极性组分第66页,共79页，星期六，2024年，5月三、离子交换色谱固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂流动相：阴离子离子交换树脂作固定相—酸性水溶液阳离子离子交换树脂作固定相—碱性水溶液基本原理：组分在固定相上发生反复离子交换反应，基于组分与离子交换剂之间亲和力的差异进行分离。应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。第67页,共79页，星期六，2024年，5月选择性系数注：Ks与离子的电荷数、水合离子半径、流动相性质、离子交换树脂性质以及温度有关固定离子可交换离子待测离子以阳离子离子交换为例：RSO3-H++X+→RSO3-X++H+第68页,共79页，星期六，2024年，5月第69页,共79页，星期六，2024年，5月四、离子色谱传统离子交换色谱存在着两个难于解决的问题：(1)需要高浓度淋洗液洗脱且洗脱时间很长；(2)洗脱后的组分缺乏灵敏、快速的在线检测方法。第70页,共79页，星期六，2024年，5月1.离子色谱法原理离子色谱法：以离子交换树脂为固定相，以电解质溶液为流动相，用于分离阴阳离子。离子色谱中，应用最为广泛的的检测器为电导检测器。为消除流动相中强电解质背景离子对检测器的干扰，常设置一个抑制柱，称为双柱型离子色谱法或化学抑制型离子色谱法。第71页,共79页，星期六，2024年，5月2.离子色谱法基本装置离子色谱连续抑制装置图

(以测定阴离子为例)第72页,共79页，星期六，2024年，5月分离分析Br-为例分离柱上发生离子交换：NaOH洗脱：分离柱上流出Na+（大量）、Br-、OH-（大量）抑制柱上发生离子交换：进入检测器：H2O、HBr第73页,共79页，星期六，2024年，5月双柱；薄壳型阴离子交换树脂分离柱(3×250mm),流动相：0.003mol·L-1NaHCO3/0.0024mol·L-1Na2CO3，流量138mL/hr。第74页,共79页，星期六，2024年，5月（1）分析速度快可在数分钟内完成一个试样的分析；（2）分离能力高在适宜的条件下，可使常见的各种阴离子混合物分离；例：使用双柱法，在十几分钟内，可使七种阴离子完全分离。（3）分离混合阴离子的最有效方法（4）耐腐蚀，仪器流路采用全塑件，玻璃柱第75页,共79页，星期六，2024年，5月五、离子对色谱原理：将一种（或多种）与溶质离子电荷相反的离子（对离子或反离子）加到流动相中使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物，使其能够在两相之间进行分配；阴离子分离：常采用烷基铵类，如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲铵作为对离子；阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对离子；反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C-18柱)，含有对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子X-进入流动相后，生成疏水性离子对Y+X-后；在两相间分配。第76页,共79页，星期六，2024年，5月六、排阻色谱色谱固定相：凝胶(具有一定大小孔隙分布)；原理：按分子大小分离。小分子可以扩散到凝胶空隙，由其中通过，出峰最慢；中等分子只能通过部分凝胶空隙，中速通过；而大分子被排斥在外，出峰最快；溶剂分子小，故在最后出峰。可对