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脓毒症AKI时肾组织细胞凋亡及与TLR4/9通络关系的实验研究的开题报告

一、研究背景与意义

脓毒症（sepsis）是一种由于感染导致全身炎症反应综合征（SIRS）而引起的急性疾病，其重症程度因感染、免疫状态、环境因素等诸多因素影响而变化巨大。肾脏是脓毒症发生时最常受到影响的器官之一，肾功能障碍会严重影响患者的治疗和预后。其中急性肾损伤（AKI）是一种常见的肾功能障碍，其病理生理机制尚未完全明确。

细胞凋亡作为一种基本的细胞死亡方式，在局部病变和整体发育等过程中都发挥着重要的生物学作用。近年来，研究发现肾脏急性损伤时，肾小管细胞凋亡的发生与发展有着紧密的关系，肾小管细胞凋亡是肾损伤引起的肾小球滤过率下降及肾功能障碍的重要原因之一。因此，了解并探究肾小管细胞凋亡的调控机制，对于提高肾脏损伤的治疗效果具有重要意义。

另外，Toll样受体（TLR）是一类通过识别病原体、标记分子等诱导炎症反应的受体。目前，TLR4和TLR9被认为在肾脏的innermedullary区域起着重要作用，但是关于TLR4/9在肾小管细胞凋亡发生中的作用及机制尚不清楚。因此，本研究旨在探究脓毒症AKI时肾组织细胞凋亡及与TLR4/9通络关系的实验研究，从而对脓毒症AKI的发病机制及治疗方案等方面提供参考。

二、研究内容与方法

1.实验材料和方法

（1）材料：50只Wister大鼠

（2）方法：

①将大鼠随机分为对照组和实验组，实验组大鼠注射脂多糖（LPS）诱导脓毒症AKI，对照组大鼠注射等量的生理盐水作为对照；

②根据大鼠体重将注射量调整至每只大鼠40mg/kgLPS，注射方式为腹腔注射2mL；

③24小时后解剖取肾脏组织，观察肾小管细胞凋亡情况，并在肾脏组织切片中应用细胞凋亡检测试剂盒进行检测；

④对肾小管细胞凋亡的表达水平进行定量PCR和Westernblotting实验，以此探究TLR4/9在肾小管细胞凋亡中的作用及相关机制。

2.实验预期结果

（1）对照组大鼠肾小管细胞凋亡情况较少，肾脏功能正常；

（2）实验组大鼠肾小管细胞凋亡情况明显增多，肾脏功能受损；

（3）实验组大鼠的TLR4/9表达水平相对于对照组明显升高，肾小管细胞凋亡与TLR4/9有相关性。

三、研究带来的贡献

通过本次实验研究，可以探究脓毒症AKI时肾组织细胞凋亡的机制及相关因素，对脓毒症AKI的发病机制及治疗方案等方面提供参考。