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miR--200c靶向UBQLN1调节自噬及乳腺癌的辐射抵抗的开题报告
一、研究背景
乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤,是女性死亡率高居第一的癌症之一。乳腺癌的病因复杂,其中辐射是一种可能的致癌因素。放射治疗是乳腺癌的重要治疗手段,但仍存在辐射剂量不足、辐射抵抗等问题。
自噬是一种细胞自身分解和回收的进程。在细胞应对环境应激、缺氧、损伤等方面具有重要的功能。近年来的研究表明,自噬与肿瘤的发生发展密切相关,而且在肿瘤辐射抵抗方面也有重要作用。
miRNA是一种短链非编码RNA,可以在转录后水解为长度约20~22个碱基的小分子RNA。miRNA与识别其mRNA靶点的RNA诱导靶向降解(RNAi)或翻译后调节等多种方式调节目标基因的表达。在肿瘤发生发展和治疗中起到重要作用。
二、研究目的
本研究旨在探究miR-200c在乳腺癌细胞辐射抵抗中的作用及随之调控的自噬相关蛋白UBQLN1的表达变化,以期为乳腺癌辐射治疗提供新的治疗策略和目标。
三、研究方法
1.细胞培养:选取乳腺癌细胞系MCF-7,培养至对数生长期。
2.细胞辐射:乳腺癌细胞系MCF-7分为对照组(未接受辐射)和实验组(接受5Gy辐射)。辐射后收集细胞,观察细胞生长状态。
3.miRNA转染:选用miR-200cmimic以及对照,转染至MCF-7细胞中,观察细胞生长状态。
4.Westernblot:采用Westernblot分析miRNA转染后UBQLN1的表达量变化,以及自噬相关蛋白LC3B,SQSTM1的表达量变化。
5.细胞凋亡检测:采用AnnexinV-FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡率。
四、研究意义
本研究将探究miRNA在乳腺癌细胞辐射抵抗以及自噬调控中的作用机制,为临床治疗提供新的治疗策略和目标,可以在一定程度上提高乳腺癌患者的生存质量和生存期。
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