免疫细胞的分离与检测.pptxVIP

一、免疫细胞的特征1、免疫细胞;2;NKcells吞噬溶酶体3;4;二、免疫细胞的分离技术1、密度;1、密度梯度离心法聚蔗糖(Fi;离心前离心后稀释抗凝血淋巴细胞;2、黏附分离法-纯淋巴细胞群的;2、黏附分离法：淋巴细胞亚群的;3、荧光激活分离法（FACS）;流式细胞仪11;4、磁性分离法（1）磁铁吸引法;MACS(阳性选择法）NS1;MACS(阴性选择法）NS1;15;16;5、其他分离法花环沉降法：本法;抗原肽-MHC分子四聚体技术T;MHCI类(左)和Ⅱ类(右);三、细胞的冻存与复苏1、细胞冻;细胞冻存罐21;第二节免疫细胞膜分子的检测;一、免疫细胞膜分子检测的原理与;二、免疫细胞膜分子的主要检测方;SmIg的荧光抗体检测法25;SmIg的酶免疫检测法26;补体依赖的细胞毒试验（CDC）;E-花环：利用T细胞膜上的异种;29;EA-花环：B淋巴细胞表面有F;EAC-花环：B淋巴细胞表面有;第三节免疫细胞功能测定一、;1、淋巴细胞转化试验：刺激物分;34;放射性测定3H-TdR丝裂原（;1、T细胞介导的细胞毒试验2、;放射性测定细胞毒试验原理示意靶;2、K细胞活性测定（ADCC活;THANKYOUSU;（1）原理将靶细胞用51Cr标;（2）方法1、试验管：效应细胞;（3）结果判断和计算51Cr实;3、NK细胞活性测定NK细胞是;（1）试剂小鼠脾细胞悬液:分;（2）方法试验组孔：脾细胞悬;1、直接溶血空斑试验2、间接溶;1、直接溶血空斑试验47;2、间接溶血空斑试验48;3、SPA-SRBC溶血空斑试;1、细胞吞噬功能试验2、细胞杀;51;吞噬百分率=吞有颗粒的吞噬;NBT还原试验原理：N-N-C;NBT还原试验方法：1、抗凝血;第四节免疫细胞凋亡测定一、;一、细胞凋亡的概念与原理1、细;1、细胞凋亡（apoptosi;虽然凋亡与坏死的最终结果极为相;凋亡坏死机制基因调控的程序化细;2、细胞凋亡的原理凋亡信号——;细胞凋亡机制（动画）61;3、细胞凋亡的特点（1）细胞皱;细胞凋亡63;二、细胞凋亡的检测方法1、形态;1、形态观察法（1）普通光镜检;甲基绿-派诺宁染色：光学显微镜;（2）荧光显微镜检测—溴化丙锭;（3）透射电子显微镜：已经用于;2、生化检测法（1）凝胶电泳法;（1）凝胶电泳法原理：凋亡细胞;凝胶电泳特点(1)本方法不能;（2）原位末端标记法（TUNE;TUNEL染色：细胞核固缩有的;（3）二苯胺分光??度法原理：细;凋亡百分率=上清液OD值上;THANKYOUSU