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- 2024-06-07 发布于吉林
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大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色
大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色步骤如下:
(一)固定与修块
取组织块放入Bouin氏液中,组织块的直径应小于7mm。6小时左右后用双面
刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。
(二)脱水与透明1.75%乙醇50分钟
2.85%乙醇50分钟
3.95%乙醇(I)30分钟
4.95%乙醇(II)30分钟
5.100%乙醇(I)30分钟
6.100%乙醇(II)30分钟
71/2二甲苯(乙醇与二甲苯等体积)20分钟
8.二甲苯(I)20分钟
9.二甲苯(II)10分钟(可依据透明效果而定)
若脱水不好,二甲苯溶液颜色会变混浊。在每一步骤之后,要充分滤干组织
块,一般用筒纸吸干组织块上的液体,以免影响其他液体的浓度,但也要防止组织块干燥。全过程约需要5h。
(三)浸蜡、包埋与修蜡块1.浸蜡:
将60℃恒温箱打开,使石蜡充分溶解,待脱水与透明结束后,将组织块转入石蜡里,放置于60℃恒温箱120分钟。
2.包埋:
将60℃的石蜡倒入纸盒内,然后用小镊子将各组织块按一定的顺
序排列好,使切面朝下。不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中,以保证切片和染色条件相同。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固,可将纸盒置于一玻璃板上(或大培养皿内),然后将玻璃板置于80-
90℃左右热水上,包埋时蜡盒底部
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