粮食、油料主要化学指标检验 维生素的测定.pptx

维生素的测定

;一、实验原理

试样中L（+）-抗坏血酸经活性炭氧化为L（+）-脱氢抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成有荧光的喹唔啉，其荧光强度与L（+）-抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定试样中L（+）-抗坏血酸总量。;二、适用范围

本法适用于乳粉、蔬菜、水果及其制品

中L（+）-抗坏血酸总量的测定。;三、试剂和材料

（1）偏磷酸-乙酸溶液（2）硫酸溶液（0.15mol/L）

（3）偏磷酸-乙酸-硫酸溶液（4）乙酸钠溶液（500g/L）

（5）硼酸-乙酸钠溶液（6）邻苯二胺溶液（200mg/L）

（7）酸性活性炭（8）百里酚蓝指示剂溶液（0.4mg/mL）

（9）L（+）-抗坏血酸标准溶液（1.000mg/mL）

（10）L（+）-抗坏血酸标准工作液（100.0μg/mL）

;四、实验仪器

荧光分光光度计：具有激发波长338nm及发射波长420nm。

配有1cm比色皿。

;五、操作步骤

整个检测过程应在避光条件下进行。

1.试液的制备

2.测定

3.标准曲线的制备

4.试样测定

5.结果计算：

;六、说明及注意事项

L（+）-脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除试样中荧光杂质产生的干扰。