骨代谢异常的生物化学检验.ppt

****************三、骨转换相关标志物检测1.骨钙素测定放射免疫法（RIA法）酶联免疫法（ELISA法）亲和素-生物素酶免疫测定法(BAEIA)化学发光免疫分析法(CLIA)免疫荧光分析法(FIA)等目前应用最多的是RIA法和ELISA法（一）骨形成标志物的检测第62页,共88页，星期六，2024年，5月2.骨性碱性磷酸酶测定（1）化学法：先识别或分离出BALP，再测定其碱性磷酸酶的活性。（2）免疫放射法(IRMA)测定BALP：IRMA法定量检测骨ALP可作为筛选试验，高值标本须用电泳法证实除去肝ALP干扰，检测骨ALP过低标本时，以电泳法为首选。（3）化学发光免疫分析法：具有高度的特异性和敏感性，而且操作简便，被认为是目前鉴别和定量分析BALP的最佳方法。第63页,共88页，星期六，2024年，5月3.I型前胶原肽I型前胶原羧基端前肽（PICP）I型前胶原氨基端前肽（PINP）检测方法：放射免疫法（RIA法）酶联免疫法（ELISA法）制备抗PINPα1链的抗体建立的免疫标记法是测定PINP的主要方法。第64页,共88页，星期六，2024年，5月1.吡啶酚（PYD）和脱氧吡啶酚（DPD）测定方法：HPLC法：用HPLC-荧光检测法测定。ELISA法：用竞争性单克隆抗体测定脱氧吡啶酚。RIA法：用用同位素标记抗体检测吡啶酚。（二）骨吸收标志物检测第65页,共88页，星期六，2024年，5月2.I型胶原C端肽和N端肽测定测定方法：HPLC法：用HPLC-荧光检测法测定。ELISA法：用竞争性单克隆抗体测定Ⅰ型胶原交联区的C端和N端肽是目前主要采用的方法。RIA法：用同位素标记抗体检测吡啶酚。第66页,共88页，星期六，2024年，5月3.耐酒石酸酸性磷酸酶检测方法酶动力学法电泳法放射免疫法酶联免疫法第67页,共88页，星期六，2024年，5月4.尿羟脯氨酸检测（HOP）测定方法：（1）化学试剂法：尿总HOP测定采用酸性环境中将胶原肽链上的HOP水解下来，再氧化生成吡咯，用Ehrlich试剂（酸性对二甲氨基苯甲醛试剂）显色。（2）离子交换色谱反向HPLC法。第68页,共88页，星期六，2024年，5月第五节骨代谢异常检测的临床应用第69页,共88页，星期六，2024年，5月代谢性骨病是一种伴有钙、磷、镁、维生素D代谢和甲状旁腺功能异常的全身骨骼病。临床上以骨重建紊乱所致的骨转换率异常、骨痛、骨畸形和骨折为主要特征。常见疾病是骨质疏松症和骨软化症和佝偻病。第70页,共88页，星期六，2024年，5月骨质疏松症（osteoporosis）是以骨组织显微结构退化为特征，骨矿成分和骨基质等比例地不断减少，骨质变薄，骨小梁数量减少，骨脆性增加和骨折危险度升高的一种全身骨代谢障碍的疾病。第71页,共88页，星期六，2024年，5月常见原因：1.生长期骨形成缺陷。2.成骨细胞骨形成受损。3.增加骨吸收的其他病理生理过程。一、骨质疏松症第72页,共88页，星期六，2024年，5月年龄、种族（白色人种黑色人种黄色人种）长期低钙饮食PTH增加绝经或卵巢切除长期卧床营养缺乏糖尿病肾功能不全性别胃肠切除脂肪泻类风湿慢性肝炎骨质疏松症的危险因素第73页,共88页，星期六，2024年，5月雌激素（Estrogen）甲状旁腺激素（parathyroidhormone,PTH）降钙素（Calcitionin,CT）活性维生素D（1-25（OH）2D3)甲状腺素(Thyroxine)雄激素(Androgenichormone)皮质类固醇激素(Corticosteroidhormone)生长激素(Growthhormone,GH)与骨质疏松症有关的激素第74页,共88页，星期六，2024年，5月原发性骨质疏松症（primaryosteoporosis）占90%停经后骨质疏松症（I型）老年性骨质疏松症（II型）继发性骨质疏松症（secondaryosteoporosis）占10%分型第75页,共88页，星期六，2024年，5