环境监测实验.docx

环境分析试验教案

任课教师：赵艳琴

河北联合大学化学工程学院

试验五.差值紫外吸取光谱法测定废水中微量苯酚

一、试验目的及要求

学会使用紫外－可见分光光度计；

把握差值吸取光谱法测定废水中微量苯酚的方法。

二、试验原理

酚类化合物在酸、碱溶液中发生不同的离解，其吸取光谱也发生变化。例

如，苯酚在紫外光区有两个吸取峰，在酸性或中性溶液中，λ

为210nm和

max

272nm，在碱性溶液中，λ

位移至235nm和288nm：

max

图1为苯酚在两种溶液中的吸取光谱。在紫外分析中，有时利用不同的酸、碱条件下光谱变化的规律直接对有机化合物进展测定。

图1苯酚的紫外吸取光谱

曲线A:在0.1mol/LKOH溶液中苯酚的吸取光谱；曲线B:在中性溶液中苯酚的吸取光谱；

曲线A－B：苯酚的差值光谱

废水中含有多种有机杂质，干扰苯酚在紫外区的直接测定。假设将苯酚的中性溶液作为参比溶液，测定苯酚碱性溶液的吸取光谱，利用两种光谱的差值光谱，就有可能消退杂质的干扰，实现废水中苯酚含量的直接测定。这种利用两种溶液中吸取光谱的差异进展测定的方法，称为差值吸取光谱法。

三、仪器与试剂

仪器：紫外—可见分光光度计；容量瓶〔50mL10个〕；吸量管(10mL,5mL)。试剂：苯酚标准溶液：称取苯酚0.004mol·L-1；KOH溶液：0.1mol·L-1。

四、试验步骤

配制苯酚的标准系列溶液

将10个50mL容量瓶分成两组，各自编号。按表1所示参与各种溶液，再用水稀释至刻度，摇匀，作为苯酚的标准系列溶液。

瓶号

表1

第一组苯酚／mL

配制溶液数据表

苯酚／mL

其次组

KOH／mL

1

2.00

2.00

5.00

2

3.00

3.00

5.00

3

4.00

4.00

5.00

4

5.00

5.00

5.00

5

6.00

6.00

5.00

绘制苯酚的吸取光谱

取上述第3号的一对溶液，用1cm吸取池，以水作参比溶液，分别绘制苯酚在中性溶液和碱性溶液中的吸取光谱(250nm-320nm)。然后用苯酚的中性溶液作参比溶液，绘制苯酚在碱性溶液中的差值光谱，将数据填入表2，找差值光谱中的最大吸取波长。

测定苯酚两种溶液的光谱差值

从上述绘制的差值光谱中，选择288nm四周最大吸取波长作为测定波长λ

λ

，

max

在紫外可见分光光度计上固定测定波长为

max

，然后以中性溶液为参比，测定碱

性溶液的吸光度，即苯酚溶液两种光谱的吸光度差值。以苯酚浓度为横坐标，以

苯酚溶液两种光谱的吸光度差值为纵坐标，绘制标准曲线〔表3〕。

未知试样中苯酚含量的测定

将4个50mL容量瓶分成两组，每组2个。分别参与未知样4ml。将其中2个用去离子水稀释，其余2个参与5.0mLKOH溶液，再用去离子水稀释至刻度、分别摇匀。分成2对，用1cm吸取池测定光度差值。

五、留意事项

生疏仪器使用及留意事项；

利用差值光谱进展定量测定，两种溶液中被测物的浓度必需相等。

六、数据处理

将表中测得的光谱差值，绘制成吸光度—浓度曲线，计算回归方程；

利用所得曲线或回归方程，计算未知样品中苯酚的含量(用mol·L-1表示)；

计算苯酚在碱性溶液(288nm四周)中的表观摩尔吸取系数。

波长λ

波长λ/nm

A

A

A

中性苯酚

碱性苯酚

差值

250

255

260

265

267

269

271

273

275

280

285

287

289

291

293

295

300

305

310

315

320

表3

序号

1

2

3 4 5

苯酚体积/mL

苯酚浓度/mol.L-1

A-A

碱性 中性

七、思考题

绘制苯酚在中性溶液、碱性溶液中的光谱和差值光谱时，应如何选择参比溶液?

在苯酚的差值光谱上有两个吸取峰，本试验承受288nm测定波长，是否可以用235nm波长作测定波长?为什么?

试说明差值吸取光谱法与示差分光光度法有何不同?

试验六气相色谱分析—内标法测定邻二甲苯中杂质

一、试验目的

生疏气相色谱仪的操作，进一步了解仪器的性能。

把握内标法定量的根本原理。

学习应用内标法测定试样中杂质含量的方法。二、试验原理

对于试样中少量杂质的测定，或只需测定试样中某些组分时，可承受内标法定量。用内标法测定时需在试样中参与一种物质作为内标物，而内标物质应符合以下条件：

应是试样中不存在的物质；

内标物的色谱峰位置，应位于被测组分色谱峰的四周；

其物理性质及物化性质应与被测组分相近。

参与的量应与被测组分含量接近。

设在重量为W的试样中参与内标物重量为W，被测组分的重量为W，被测组分与

s i

内标物的色谱峰面积分别为