生化检验基础培训.pptx

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生化检查基础培训;目录;一、生化检查的对象;一、生化检查的对象;二、生化项目分类;二、生化项目分类;三、生化检测原理;三、生化检测原理;三、生化检测原理;三、生化检测原理;三、生化检测原理;三、生化检测原理;三、生化检测原理;三、生化检测原理;三、生化检测原理;吸光度的定义

朗伯比尔定理的必须条件;四、临床生化测定措施和浓度换算; NAD+-NADH系统

p-NP(p-NA)系统

H2O2偶联的指示系统

抗原抗体反应指示系统

其他显色反应;终点法

动力学法

(零级动力学法、持续检测法)

固定动力学法

(两点法、一级动力学法、初速率法);终点法的定义

指通过一段时间(一般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使所有底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是最理想的分析类型。整个反应到达平衡,由于正向反应的平衡常数很大,可认为所有的被测定物已转变为产物,反应液的吸光度不再增长(或减少),吸光度的增长(或减少)程度与被测定物的浓度成正比。

终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小的变化不敏感,只要这种变化不影响在一定期间内反应到达平衡即可。;终点法;零级动力学法定义

动力学法即一般所说的零级动力学法,也被称为持续监测法。指反应过程中反应速度维持不变,与底物浓度无关,因此,在整个反应过程中,反应物可以匀速地生成某个产物,导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增长,减小或增长的速度(△A/min)与被测物的活性或浓度成正比,重要用于酶活性的测定。

实际上,由于底物浓度不也许足够大,伴随反应的进行,底物消耗到一定程度后,反应速度不再维持不变,同样,由于血清成分复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,因此,零级动力学法是针对于特定期间段而言的,各试剂商对这段时间有严格规定。;动力学法(零级动力学法、持续检测法);固定期间法定义

固定期间法又被称为一级动力学法(firstorderkinetic)、初速率法(initialrate)、二点法(twopointrate)等。

在一定的反应时间内,反应速度与底物(被测物)浓度的一次方成正比,由于底物(被测物)在不停的消???,因此整个反应速度在不停的减小,体现为吸光度的增长(或减少)速度越来越小,此类反应到达平衡的时间很长,理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成分复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,通过一段延迟时间才能进入稳定反应期,必需在特定期间段内进行监测。;固定期间法(两点法、固定期间法、初速率法);单试剂终点法;生化仪是怎样得到成果浓度的?

6、反应度的计算;动力学法;生化仪是怎样得到成果浓度的?

6、反应度的计算;定标的意义:

浓度C反应度R吸光度A

线性定标:比色法

定标的分类:

非线性定标:比浊法

;线性定标;非线性定标——Logistic-Log4P;非线性定标——Exponential5P;Polynomial5P

Parabola

Spline;五、几种临床生化测试概念;酶的活性

酶的单位:

1分钟能转化1微摩尔底物()的酶量为一种国际单位,以IU表达。

活性的计算:

K为计算因数,与光径、稀释比、毫摩尔吸光系数有关;酶促反应动力学

影响原因:

1、底物浓度

2、温度

3、pH值

4、酶浓度;酶促反应动力学

影响原因:温度的影响;酶促反应动力学

影响原因:pH值的影响;酶促反应动力学

影响原因:酶浓度的影响;吸光度、反应度、浓度之间的关系

酶类的计算因数

熟悉掌握吸取曲线、反应曲线、定标曲线;作用:;作用:

滤除内源性干扰

滤除系统、随机干扰;;5.抗原过剩;1、熟悉掌握朗伯比尔定理

2、熟悉反应度的计算原理

3、熟悉定标/质控的原理和意义

4、应用于生化临床的技术;

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