waterse高效液相色谱.pptVIP

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waterse高效液相色谱;什么是高效液相色谱法;定量分析重要基于与原则品的比较

是其最大应用领域

定性分析;不是色谱的强项

基于样品的保留时间比较

借助于和其联用的紫外、质谱或其他检测器

对定量及定性分析的规定

敏捷度、精度及精确度的规定

样品量的规定;复杂样品的分析能力

轻易使用;高效液相色谱怎样工作;检测器连接计算机数据站,高效液相色谱系统单元先记录电信号,再将电信号转换为色谱图,在显示屏上展现出来。

定性和定量样品内溶物浓度。

由于样品中化合物性质差异很大,几种类型的检测器被开发出来。

假如一种化合物能吸取紫外光,可使用紫外吸取检测器。

假如这个化合物发荧光,可使用荧光检测器。

假如该化合物没有上述性质之一,可使用更广泛的检测器,如蒸发光散射检测器[ELSD]。

最强大的方式是次序使用多种检测器。例如,紫外和/或蒸发光检测器可和质谱仪[MS]联用来分析色谱分离的组分。这样,从一次进样,可得到分析物的更多综合的信息。将质谱与高效液相色谱系统耦合称之为液质联用.;;液相色谱的各部分示意图;仪器构成及开机

溶剂管理系统的准备

样品管理系统的准备

运行样品

数据采集

汇报打印

关机;Waterse2695型高效液相色谱仪操作措施;2开机;溶剂管理系统的准备;溶剂管理系统的准备;必须用色谱纯有机溶剂,水或缓冲盐要用超纯水;

水相流动相需要每48h重新配制,尤其是100%含水流动相;

检查6根管子与否均在液面下,必须保证6根管子所有插到溶剂瓶底部。;打开真空脱气机(degasser);Wetprime(执行湿灌注);流动相平衡色谱柱;流动相特性;流动相方面规定;流动相的转换要缓慢

流速(压力)的变化幅度较小,比较稳定

温度的变化幅度

专用色谱柱∶样品及溶剂的规定;装载样品盘(loadingcarousels):

装入样品与转盘将样品瓶插到样品盘合适的位置,打开样品仓门,显示“DoorisOpen”屏幕,装入样品盘,按【Next】,直至所有样品盘装毕,关仓门。;样品方面规定;运行样品;;运行样品;在浏览项目中打开你的项目,通过“新建措施组”来设定详细仪器措施、处理措施、汇报措施→另存为“措施组”,设置措施名(与刚刚的仪器措施名相统一)→完毕。;在“运行样品”中打开设定的仪器措施,并在设针时选定设定的措施组来对样品进行分析。;数据处理;PDA数据处理

;;;;色谱图:HPLC图形成果(Chromatogram);色谱图参数基本概念;峰面积-PeakArea

峰与峰底之间的面积,又称响应值

原则偏差;σ-StandardError

0.607倍峰高处所对应峰宽的二分之一

拖尾峰-TailingPeak

后沿较前沿平缓的不对称峰

前伸峰-LeadingPeak

前沿较后沿平缓的不对称峰

鬼峰-GhostPeak

并非由试样所产生的峰;亦称假峰;基线-Baseline

在正常操作条件下,仅由流动相所产生的响应信号的曲线

基线飘移-BaselineDrift

基线随时间定向的缓慢变化

基线噪声;N-BaselineNoise

由多种原因所引起的基线波动

谱带扩展-BandBroadening

由于纵向扩散,传质阻力等原因的影响,使组分在色谱柱内移动过程中谱带宽度增长的现象;死时间,t0-Deadtime

不被固定相滞留的组分,从进样到出现峰最大值所需的时间

保留时间,tR-Retentiontime

组分从进样到出现峰最大值所需的时间

死体积,V0-Deadvolume

不被固定相滞留的组分,从进样到出现峰最大值所需的流动相体积

保留体积,VR-Retentionvolume

组分从进样到出现峰最大值所需的流动相体积;在成果中,选择图谱点打印,汇报打印时,选择设定好的汇报模式,或者选择“缺醒单个汇报”模式打印,在待打印的模式下可以编辑汇报显示的信息,例如表头,色谱图的显示范围,表格中所需内容等。;;;关机;HPLC使用常见注意事项

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