临床细菌培养鉴定流程及报告.pptx

;思索题;医学微生物试验室基本条件及设备

医学微生物学检验基本技术

临床各种标本采集、分离培养及汇报方式

临床常见细菌分离判定;一、医学微生物试验室基本条件及设备;细菌试验室;无菌试验室;基本设备;二、医学微生物学检验基本技术;基本染色;基本接种方法;三、临床各种标本采集、分离培养及汇报方式;（一）血

当微生物侵入血液快速繁殖超出免疫系统去除这些微生物能力时形成菌血症或真菌血症。

1.血培养中常见分离菌;;⑵采血时间及采血量采血培养应该尽可能在使用抗菌药之前进行，在24小时内采集2～3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养）。对间歇性寒战或发烧应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1小时，采集血液，或于寒战或发烧后1小时进行。成人采血量8～10ml，儿童1～5ml。血液和肉汤之比1：5～1：10。

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;3.分离培养;4.结果汇报

⑴阳性结果汇报

初级汇报：阳性血培养结果非常主要，应该马上口头汇报给医生，包含革兰氏染色特征和形态，疑似何种菌等。同时统计汇报日期、时间、内容以及接收汇报人姓名。

中级汇报：汇报直接抗菌药品敏感试验结果和细菌种属初步判定结果。

最终汇报：汇报细菌种属名和标准抗菌药品敏感试验结果。

⑵阴性结果汇报

普通血培养3天无菌生长可汇报为“72小时培养未见细菌生长”但培养瓶要继续培养至7天，假如发觉有菌生长，可发补充汇报，一些特殊致病菌培养时间需延长。;（二）痰（即下呼吸道感染标本）

临床通常将正常人喉以上部位称为上呼吸道，上呼吸道定植有大量正常菌群，而气管以下包含气管、支气管和肺泡称下呼吸道，通常无菌。下呼吸道感染包含急性气管～支气管炎、慢性支气管炎急性发作，支气管扩张继发感染及肺实质感染（肺炎、肺脓肿）等。病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次氏体和原虫等。

下呼吸道感染者可有发烧、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，是下呼吸道感染细菌检验主要标本。细菌学检验能明确感染病原，并提供相关抗菌药品对分离菌抗菌活性，有利于疾病治疗、流行病学调查研究和医院感染监测。;1.呼吸道标本(痰)中常见分离细菌;2.标本采集及运输

对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS，肺炭疽，肺鼠疫等)患者采集痰标本时必须注意生物安全防护。

⑴自然咳痰法（最惯用方法）：以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿。尽可能在使用抗菌药品之前采集标本，用力咳出呼吸道深部痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水广口带盖容器中，标本量要≥1ml。标本要尽快送检，不能及时送检标本室温保留≤2小时。

;⑵支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法，均由临床医生按摄影应操作规程采集，但必须注意所采集标本尽可能防止咽喉部正常菌群污染。

⑶小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。

;⒊分离培养

(1)痰标本培养前处理：不含或粘液极少标本可直接接种，遇有含大量粘液标本，应加入等量液化剂（如PH7.610g/L胰酶溶液等），放置35℃待充分液化再行接种。亦可加液化剂后搅拌混匀离心，取沉淀物接种。

⑵普通细菌分离培养：将处理后痰标本分别划区接种于血平板(适合用于分离肺炎链球菌和其它细菌),巧克力平板(适合用于分离嗜血杆菌)和麦康凯/中国兰平板。巧克力平板需置5%二氧化碳环境（无二氧化碳培养箱可用烛缸），35℃培养24小时后观察菌落形态，涂片染色，挑取可疑纯菌落，做深入判定。;⒋结果分析及汇报

⑴结果分析痰及下呼吸道分泌物标本易受到定植在上呼吸道正常菌群污染。当从送检标本中分离出各种细菌时，确定那一个分离细菌是引发下呼吸道感染病原菌，这对临床诊疗与治疗至关主要。当在同一培养基上分离出1种以上病原菌（复合菌）时，要结合患者临床症状，涂片染色镜检情况及患者近期细菌分离培养结果等，综合判断所分离各种细菌中那一个细菌可能为致病菌，通常多为优势菌。当分离优势菌与涂片染色镜检结果一致时，要做药敏试验。若分离培养结果与涂片染色镜检结果不一致时，可不进行药敏试验，以免误导，仅汇报分离判定结果，由临床