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《医学微生物学》动物接种实验与病毒培养技术实验

实验动物在病原微生物中的研究上占有重要地位。利用实验动物可以进行病原菌的分离鉴

定、毒力的检测、制备免疫血清等生物制品；进行各种皮肤试验；建立人工感染的动物模型；

进行发病机制、疾病防治以及免疫机制的研究等。

一、实验动物的管理

1．实验室常用的动物：家兔、豚鼠、小白鼠、大白鼠、地鼠、绵羊、鸡等，根据实验的

目的选择最适宜的动物。

2．实验动物必须与正常动物分开饲养，动物室内要经常保持清洁和空气畅通，并应有防

蚊、防蝇、防逃跑及保暖设备。

3．实验动物要精心饲养，喂以适当的饲料并给以充足的水，任何动物也不要断水。

4．实验动物要有详细的记录，包括性别、体重、体表特征(如毛色等)、接种材料、接种

日期、接种途径、剂量、次数以及接种变化等。

5．实验动物应做好标记，对较大动物如家兔、豚鼠等可用金属号码牌固定于耳朵上，对

较小动物如大白鼠、小白鼠等可用复红(或苦味酸等染料)涂于身体的不同部位，以资识别。盛

装动物的笼具等，也应付以标签。

6．接种后的动物应每天观察1～2次，注意动物的精神状态，活动能力、饮食和大小便情

况，体温、注射部位的反应以及全身反应，如不安、耸毛、震颤、弓背、麻痹及死亡等，并应

详细记录之。

7．感染动物死亡后，应立即剖检或暂时冻存。动物的排泄物及使用的笼具等必须严格消

毒。任何用过的动物，不宜再做其他试验。

二、实验动物的选择

选择实验动物应注意以下几点：

1．易感性：是选择实验动物的首要条件。

2．动物健康：体质健康、发育正常、体重适宜；最好使用自己繁殖的动物，由市场购买

的动物至少经过一周的隔离观察，证明无隐性感染方可使用；某些特殊实验应需选用专门喂养

繁殖的无菌动物；实验动物应容易获得，便于喂养和管理。

3．动物大小：同一实验应选用大小一致的动物，通常以年龄或体重为标准。

4．性别：某些实验最好选用同一性别，特别是免疫的动物和需要观察较长时间的实验动

物。

5．动物品系：某些实验要求使用纯系动物，纯系小鼠用于免疫学、杂交瘤及病毒感染等

研究。

三、小白鼠腹腔接种

[目的要求]

l．掌握小白鼠腹腔接种的实验方法。

2．了解动物接种在微生物分离和鉴定中的作用。

3．了解其他的动物接种方法，如动物皮下、皮内、肌肉、家兔耳静脉注射等接种方法。

4．了解实验动物的处死和尸检的方法。

[原理]

在临床微生物实验室中，动物接种主要用于分离和鉴定病原微生物。通过在易感和不易

感动物体内传代，微生物的各种性质都可能发生变化。常用的实验动物包括大鼠、小鼠、豚鼠、

家兔及绵羊等。常见的接种部位包括皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔及脑内等部位。本实验主

要进行小鼠的腹腔内接种。

[器材和动物]

1．菌液肺炎链球菌培养液。

2．器具鼠笼、无菌注射器、棉球煮针锅、剪刀、解剖台、大头针、纸张。

3．试剂碘酒、酒精、3％来苏儿、凡士林。

4．动物小白鼠。

[步骤和方法]

１.接种方法：

（１）用无菌注射器以无菌操作方式吸取肺炎链球菌培养液，吸取量稍多于使用量，排除气

泡(将注射器针头朝上，使气泡上升，在针头上裹以消毒棉球，然后轻轻推出，须避免菌液四

溅，特别注意防止眼结膜感染)。

（２）用右手轻拖小白鼠尾，使其爬行于粗糙物面上，再用左手拇指和示指抓紧小白鼠两耳

及颈项皮肤，鼠体被固定在左手手指与掌间，用左手无名指和小指夹住鼠尾，用碘酒消毒腹壁

皮肤。

（３）左手倾斜，使小鼠头部稍向下，将预先准备好的菌液注入腹腔内，注射时右手持已吸

有菌液的注射器，针尖自小白鼠左侧腹股沟处刺穿皮肤，使针尖(针头宜小，常用5号针头)

在皮下组织内向前移动1cm左右，然后再轻轻向下刺进腹腔。抽吸注射器，如无回血或尿液，

表示针头未刺人肝、膀胱等脏器，即可进行注射，注入菌液0.2ml后将针头退出，用酒精棉球

轻擦针刺处消毒。

（４）将接种小鼠用的肺炎链球菌菌液作一张细菌涂片，以备与以后的实验结果比较。

（５）将注射后的小白鼠做好标记(以染液涂于鼠的头部或背部)，置于鼠笼中，填写实验动

物记录卡或标签，包括实验动物的名称、编号、注射材料及部位、剂量和注射日期等，然后将

卡片挂在动物容器上。

２.结果观察方法：

（１）感染动物须隔离喂养，并逐日观察，注意有无发病症状，如食欲不振、竖