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目的：建立一套可靠的鼠肺细胞分离、纯化和培养技术,用于体外研究间质性肺
病的发病机制及治疗方法。方法：采用胰酶消化出生后2dSD大鼠肺组织块及SD大鼠肺
泡灌洗液,经差时贴壁法,分离、纯化红皮鼠肺成纤维细胞(lungfibroblast,LF)和SD大鼠肺
泡巨噬细胞（pulmonaryalveolarmacrophage,AM）,并进行原代培养。用波形蛋白(Vimentin)、
CD14细胞免疫荧光染色、蛋白质印迹和电镜对所分离的细胞进行鉴定。结果：所得细胞
产量大、纯度高。细胞免疫荧光染色LF细胞波形蛋白染色阳性而CD14染色阴性；AM细
胞则相反。扫描电镜观察可见肺成纤维细胞有微绒毛，细胞间连接成网状，蛋白质印迹结果
显示波形蛋白表达。结论：该方法是一种可靠的红皮鼠肺成纤维细胞及大鼠肺巨噬细胞的
分离纯化培养技术,可用于间质性肺病（interstitiallungdisease,ILD）的发病机制及治疗方
法的体外研究。
【关键词】大鼠;肺成纤维细胞;巨噬细胞;原代细胞培养
［基金项目］江苏省高校自然科学研究计划项目（03KJD320076）;镇江市社会发展科技计
划项目（SH2004043）
Isolationandpurificationandprimarycultureoflungcellsfromrats
YANYu-lan,LIUYang,BUXue-feng,ZHANGZhi-jian,ZHENGJin-xu
(DepartmentofRespiratoryMedicine,theAffiliatedPeople′sHospitalofJiangsu
University,ZhenjiangJiangsu212002;SchoolofMedicine，JiangsuUniversity,Zhenjiang
Jiangsu212013,China)
［Abstract］Objective:Todevelopeareliablemethodforisolation,purificationand
primarycultureoflungfibroblast(LF)andpulmonaryalveolarmacrophage(AM)fromratfor
studiesonpathogenesisandtreatmentofinterstitiallungdiseaseinvitro.Methods：Thelung
tissueof2daysoldimmatureratswasdigestedwithtrypsin.LFsandAMswereisolatedand
purified,thencultured.ThenatureofthecultureswasidentifiedbyCD14staining,vimentin
staining,electronmicrographyandWesternblot.Results：Excellentyieldsofhighlypurified,
culturableAMsandLFscouldbeobtainedfromadultratsand2daybabyishratlungs,respectively.
TheexpressionofCD14inAMswaspositiveandthatofvimentinnegativeby
immunofluorescencechemistry.Those,however,inLFswerejustopposite.Ramifiedstracture
betweenpurifiedLFswereobservedbyultrastructuralexaminationunderelectron
micrography.Vimentinin
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