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1.2.1微生物的基本培育技术学问梳理
微生物:难以用______肉眼______视察的微小生物的统称。包括以下类群:
病毒(无细胞结构生物):SARS病毒、新冠病毒等______RNA______病毒;T2噬菌体等______DNA______病毒。
细菌(原核生物):蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等;放线菌:衣氏放线菌等。
真菌(真核生物):酵母菌、毛霉等;原生生物:草履虫、变形虫等。
防止______杂菌污染______,获得纯净的微生物培育物是探讨和应用微生物的前提,也是酵工程的重要基础。
试验室培育微生物的条件:①要为人们须要的微生物供应合适的______养分______和______环境______条件;②要确保______其他微生物______无法混入,并将______须要的微生物______分别出来。
一、培育基的配制
1.培育基的概念和类型
(1)概念:人们依据微生物对______养分物质______的不同需求,配制出供其______生长繁殖______的养分基质,即培育基。
(2)培育基的作用:用以______培育______、______分别______、______鉴定______、______保存______微生物或______积累______其代谢物。
(3)培育基的类型
标准
培育基种类
培育基特点
作用
物理性质
_____固体培育基_____
加凝固剂,如琼脂
微生物的分别与鉴定,活菌计数,保藏菌种
___半固体培育基_____
容器放倒不致流出,猛烈振动则破散
视察微生物的运动、分类鉴定
____液体培育基______
不加凝固剂
常用于工业生产
功能
____选择培育基______
依据某种微生物的特别养分要求配置
选择分别
____鉴别培育基______
加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂
鉴定
成分来源
____自然培育基______
含化学成分不明确的自然物质
工业生产
____合成培育基______
用已知的化学物质配制
分类鉴定
2.培育基的配制
(1)基本成分:水、碳源、氮源、无机盐。
①碳源:
a.无机碳源:CO2、CO32-、HCO3-→______自养______微生物;
b.有机碳源:葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等→______异养______微生物。
②氮源:
a.无机氮源:NH4+、NO3-、NH3等。
b.有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、______尿素______、氨基酸等。
留意:含C、H、O、N的有机物是______异养型______微生物的碳源、氮源、能源。如______氨基酸______等。
(2)特别需求:某些微生物对___pH___、特别养分物质以及____O2___的需求。特别养分物质:______维生素______、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)
①培育乳酸杆菌时,须要在培育基中添加______维生素______;
②培育霉菌时,须要将培育基调至______酸性______;
③培育细菌时,须要将培育基调至______中性______或______弱碱性______;
④培育厌氧微生物时,须要供应______无氧______的条件。
3.培育基的配制原则
(1)目的要明确:不同的微生物需求不同,依据培育目的进行配制。
(2)养分要协调:养分物质的浓度和比例要相宜。
(3)pH要相宜:为维持pH的相对恒定,可在培育基中加入缓冲剂,常用K2HPO4-KH2PO4。
4.培育基的成分及功能
养分物质
作用
功能
主要来源
碳源
能为微生物代谢供应碳元素
构成生物体的细胞物质和一些代谢产物,有些是异养生物的能源物质
无机碳源:CO2、NaHCO3等;有机碳源:糖类、脂质、蛋白质、有机酸等
氮源
能为微生物的代谢供应氮元素
合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物
无机化合物:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨等
水
是生命活动所必需的
不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定
外界摄入
无机盐
为微生物供应除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素
细胞内的组成成分,生理调整物质,某些化能自养菌的能源,酶的激活剂
无机化合物
二、无菌技术
获得纯净的微生物培育物的关键是______防止杂菌污染______。无菌技术应围围着如何避开杂菌的污染绽开,主要包括______消毒______和______灭菌______。
消毒和灭菌工作的两个方面:
(1)对试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和______消毒______。
(2)将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等进行______灭菌______。留意:避开已经______灭菌______处理的材料用具与四周的物品接触。为了避开四周环境中微生物的污染
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