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响应面法优化秋葵总黄酮的提取工艺

汇报人：

2024-01-27

目录

contents

引言

材料与方法

响应面法优化提取工艺

结果与讨论

秋葵总黄酮的生物活性研究

结论与展望

01

引言

秋葵是一种营养丰富的蔬菜，含有大量的黄酮类化合物，具有多种生物活性和药用价值。

目前，秋葵总黄酮的提取工艺存在一些问题，如提取效率低、溶剂残留等，需要进一步优化。

响应面法是一种有效的优化方法，可以通过建立数学模型对多个因素进行优化，提高提取效率和质量。

秋葵总黄酮是指从秋葵中提取的一类黄酮类化合物，具有多种生物活性和药用价值。

秋葵总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖等多种生物活性，对人体健康有益。

秋葵总黄酮的提取工艺对其活性成分的保留和提取效率有重要影响。

目前，秋葵总黄酮的提取工艺主要包括溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。

这些提取工艺存在一些问题，如提取效率低、溶剂残留、操作复杂等，需要进一步优化。

响应面法可以通过建立数学模型对多个因素进行优化，提高提取效率和质量，是解决这些问题的有效方法。

02

材料与方法

新鲜秋葵，购自当地农贸市场。

秋葵

分析纯，用于提取秋葵中的总黄酮。

乙醇

分析纯，用于黄酮含量的测定。

亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠

用于绘制黄酮含量标准曲线。

芦丁标准品

03

紫外可见分光光度计

用于测定黄酮含量。

01

高速万能粉碎机

用于将秋葵粉碎成细粉。

02

旋转蒸发仪

用于浓缩提取液。

秋葵预处理

将新鲜秋葵清洗干净，去蒂，切成小段，置于高速万能粉碎机中粉碎成细粉。

总黄酮的提取

称取一定量秋葵细粉，加入一定体积分数的乙醇溶液，在恒温水浴锅中加热回流提取一定时间，过滤得到提取液。

提取液的浓缩

将提取液置于旋转蒸发仪中浓缩至一定体积，得到浓缩液。

黄酮含量的测定

采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定浓缩液中黄酮含量。以芦丁为标准品绘制标准曲线，根据标准曲线计算样品中黄酮含量。

响应面法优化实验设计

以乙醇体积分数、提取温度、提取时间为自变量，黄酮提取率为因变量，采用Box-Behnken设计响应面实验，通过多元回归拟合得到二次多项式模型，分析各因素对黄酮提取率的影响及交互作用，确定最佳提取工艺条件。

03

响应面法优化提取工艺

原理

响应面法是一种通过构建数学模型，描述自变量与因变量之间关系的方法。在优化提取工艺中，自变量通常为提取条件（如时间、温度、溶剂浓度等），因变量为目标成分（如总黄酮）的提取率。

步骤

确定自变量与因变量；设计实验方案；进行实验并收集数据；构建响应面模型；对模型进行验证。

提取溶剂的选择

根据目标成分的溶解性，选择合适的溶剂，如乙醇、甲醇等。

提取条件的优化

通过单因素实验和正交实验等方法，确定最佳的提取时间、温度、溶剂浓度等条件。

提取次数的确定

根据目标成分的提取率和实验成本等因素，确定合适的提取次数。

模型的建立

利用实验数据，构建响应面模型，如多元线性回归模型、二次多项式模型等。

模型的验证

通过预留的验证集或交叉验证等方法，对模型的预测性能进行评估，确保模型的有效性和可靠性。

最优解的确定

根据响应面模型，确定自变量范围内的最优解，即最佳提取工艺参数组合。

04

结果与讨论

料液比对总黄酮得率的影响

随着料液比的增加，总黄酮得率呈现先上升后下降的趋势。当料液比过低时，溶剂不足以充分提取秋葵中的黄酮类化合物；而当料液比过高时，虽然提取率有所提高，但杂质溶出也会增加，导致后续分离纯化困难。

提取时间对总黄酮得率的影响

随着提取时间的延长，总黄酮得率逐渐增加。这是因为黄酮类化合物在溶剂中的溶解需要一定的时间，时间过短则提取不充分。然而，当提取时间过长时，可能会导致黄酮类化合物的降解，从而降低得率。

提取温度对总黄酮得率的影响

提取温度对总黄酮得率的影响较为显著。随着温度的升高，黄酮类化合物的溶解度增加，有利于提取。但温度过高可能导致黄酮类化合物的热降解，同时增加能耗和生产成本。

VS

通过Design-Expert软件对实验数据进行多元回归拟合，建立二次多项式模型。对模型进行方差分析（ANOVA），结果显示模型显著（P0.05），说明该模型能够较好地预测秋葵总黄酮的得率。

响应面图分析

根据模型绘制的响应面图可以直观地看出各因素及其交互作用对总黄酮得率的影响。通过比较不同因素响应面的陡峭程度，可以判断各因素对得率影响的显著性。

模型建立与显著性检验

综合以上实验结果和分析，确定秋葵总黄酮的最佳提取工艺条件为：料液比1:20（g/mL），提取时间60min，提取温度60℃。

最优工艺条件的确定

在最优工艺条件下进行三次平行验证实验，结果显示秋葵总黄酮的平均得率与预测值接近，且重复性良好，证明该工艺条件稳定可靠。

验证实验结果

05

秋葵总黄酮的生物活性