生物制药技术知识要点.pdfVIP

第一章

1、生物技术与微电技术，新材料、新能源并列，是四大科学技术支柱，生物技术

是以生命科学为基础，利用生物的特性和功能，设计构建具有预期性状的新物种或新品

系，并与工程相结合，利用这样的新物种，进行加工生产，为社会提供商品和服务的一个

综合性的技术系。

2、生物技术可以分为传统生物技术、近代生物技术、现代生物技术。

3、近代生物技术的特点：（1）产品类型多（2）生产技术要求高（3）生产设

备规模大

（4）技术发展速度快

4、现代生物药物四大类型：（1）应用重组DNA技术（2）基因药物（3）来自

动、植物和微生物的天然生物药物（4）合成与部分合成的生物药物

5、根据生物药物的功能途径可分为：（1）治疗药物（2）预防药物（3）诊断药

物

6、生物技术药物的特性

（1）分子结构复杂（2）具有种属特异性（3）治疗针对性强、疗效高（4）稳定

性差（5）基因稳定性（6）免疫原性（7）体内半衰期短（8）受体效应

（9）多效性和网络性效应（10）检验的特殊性

7、生物技术制药的特征：（1）高技术（2）高投入（3）长周期（4）高风险（5）

高收益

第二章

1.基因工程药物分类：（1）免疫性蛋白（2）细胞因（3）激素（4）酶类

2.基因工程生产药物的优点在于：

（1）可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用建立有效的保障。

（2）可提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入研究，从

而扩大这些物质的应用范围。

（3）可以发掘更多的内源性生理活性物质。

（4）内源性生理活性物质在作为药物使用时，存在不足，可通过基因工程和蛋白质工

程对其进行改造。

（5）可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。

3.基因工程药物制造的主要步骤:目的基因的克隆，构建DNA重组，构建工程菌，

目的基因的表达，外源基因表达产物的分离纯化，产品的检验。

4.制备基因工程药物的基本过程：获得目的基因—构建重组质粒—构建基因工程菌—

培养工程菌—产物分离纯化—除菌过滤—半成品检定—成品检定—包装

5.目的基因的获得：

（一）反转录法：（1）mRNA的纯化（2）cDNA第一链的合成（3）cDNA第二链

的合成

（4）cDNA克隆（5）将重组体导入宿主细胞（6）cDNA文库的坚定

（7）目的cDNA克隆的和鉴定

（二）反转录—聚合酶链反应法

（三）化学合成法

（四）筛选基因的新方法

（五）对已现基因的改造

6.基因表达：是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有工过程。

7.基因高效表达：是指外源基因在某种细胞中的表达活性，即剪切下一个外源基因片

段，拼接到另一个基因表达体系中，使其能获得既有原生物活性又可高产的表达产物。

8.宿主菌应满足以要求：具有高浓度、高产量、高产率；能利用易得廉价原料；不

致病、不产生内毒素；发热量低，需氧低，适的发酵温度和细胞形态；容易进行代谢调

控；容易进行重组DNA技术；产物容易提取纯化。

9.影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素：

（1）外源基因的剂量（2）外源基因的表达效率（3）表达产物的稳定性

（4）细胞的代谢负荷（5）工程菌的培养条件

9、影响目的基因在酵母菌中表达的因素：外源基因的剂量、外源基因的表达效率、外

源蛋白的糖基化、宿主菌的影响。

9.控制菌生长对提高质粒的稳定性，减少代谢副产物的积累，提高外援蛋白产率都

有重要意义。

10.基因工程菌生长代谢的特点：

（一）菌生长于能量的关系：各种碳源通过有限的呼吸能力所能提供的最大量决定

了菌在这种培养基中的最大生长速率。

（二）菌生长和前供应的关系：对于基因工程菌来说，由于质粒的复制和外源基

因的转录和译翻需要与住宿菌竞争共同的前和催化结构，从而加剧了这些成分的不足。

11.质粒不稳定性分为分裂不稳定和结构不稳定。

分裂不稳定：指工程菌分裂时出现一定比例不质粒的子代菌的现象。

结构不稳定：是DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致