焦磷酸测序法检测CDA基因多态性的试剂盒及方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN102643907A

(43)申请公布日2012.08.22

(21)申请号CN201210094440.9

(22)申请日2012.04.01

(71)申请人周宏灏

地址410078湖南省长沙市开福区湘雅路110号中南大学临床药理研究所

(72)发明人周宏灏

(74)专利代理机构长沙正奇专利事务所有限责任公司

代理人卢宏

(51)Int.CI

C12Q1/68

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

焦磷酸测序法检测CDA基因多态

性的试剂盒及方法

(57)摘要

本发明公开了一种焦磷酸测序法检

测CDA基因多态性的试剂盒及方法。所述

试剂盒CDA基因多态性进行检查，具体是

指rG＞A)单核苷酸多态性。试

剂盒包含如SEQIDNO.2-4所示的引物。

本发明的试剂盒及方法，可以实现准确、

快捷、高通量CDA基因多态性的检测，从

而达到对其底物吉西他滨实现安全合理有

效的个体化给药。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

专利权保全的解除IPC(主分

类):C12Q1/68专利

号:ZL2012100944409申请专利权的保全及其解

2022-12-30

日权公告除

日记生效日:解除

日

未缴年费专利权终止IPC(主分

类):C12Q1/68专利

2023-05-16号:ZL2012100944409申请专利权的终止

日权公告

日

权利要求说明书

1.一种焦磷酸测序法检测CDA基因多态性的试剂盒，其特征在于，包括如下

引物：

(1)扩增引物：

上游引物：5′-AGGGTGCAACATAGAAAAT-3′；

下游引物：5′-TTGCCCTGAAATCCTTGTACC-3′；

其中，下游引物的5′进行生物素标记；

(2)测序引物：5′-TGTGCTGAACGGACC-3′。

2.一种应用权利要求1所述的试剂盒检测CDA基因多态性的方法，包括如下

步骤：

(1)DNA提取；

(2)聚合酶链反应：

配制50μlPCR扩增体系，包含：10×PCRbuffer5.0μl，dNTP1.5μl，上游

引物0.5μl，下游引物0.5μl，rTaq0.5μl，水40μl，模板2μl；循环程序为：

95℃5min预变性；依次在95℃30S，52℃30S，72℃30S，进行

35个循环；72℃保持5min，最终保持在4℃，得扩增产物；

(3)焦磷酸测序单链样本纯化；

(4)焦磷酸测序及结果分析。

说明书

p技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体涉及焦磷酸测序法检测CDA基因多态性