蛋白质化学专业知识讲座.pptxVIP

蛋白质化学专业知识讲座;蛋白质是由许多不一样α-氨基酸按一定序列经过酰胺键（肽键）缩合而成，含有较稳定构象并含有一定生物功效大分子。;一、蛋白质生物学意义;二、蛋白质元素组成;三、蛋白质氨基酸组成;不带电形式;（二）氨基酸分类;（三）氨基酸主要理化性质;调整氨基酸溶液pH，使氨基酸分子上—+NH3基和—COO-基解离程度完全相等时，即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液pH值称为该氨基酸等电点（pI）。;氨基酸等电点确实定：;;[Ala+]=;整理：K1K2[Ala±]=[Ala±][H+][H+]

K1K2=[H+]2

两端取对数：-lg[H+]2=-lgK1-lgK2

∵-lgK1=pk1-lgK2=pk2

∴2（-lg[H+]）=pk1+pk2

依据pH定义得：pH=lg1/[H+]=-lg[H+]

∴2pH=pk1+pk2

pI=1/2(pk1+pk2);中性氨基酸：pI=(pK1+pK2)/2

酸性氨基酸：pI=(pK1+pKR-COO-)/2

碱性氨基酸：pI=(pK2+pKR-NH2)/2

pK1指α-羧基离解常数负对数值；

pK2指α-氨基离解常数负对数值

pKR指侧链R基离解常数负对数值。;（2）与甲醛反应：氨基酸甲醛滴定法;（3）与2,4-二硝基氟苯(DNFB)反应;H2N—CH—COOH+;（4）与异硫氰酸苯酯（PITC）反应;（5）与荧光胺反应：

依据荧光强度测定氨基酸含量（ng级）。激发波长λx=390nm，发射波长λm=475nm。;H2N—CH;四、肽;（一）谷光甘肽（GSH）;（三）促肾上腺皮质激素（ACTH）;（五）胆囊收缩素;五、蛋白质结构;HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Tyr–Leu-Val-Cys-Gly;一级结构确定标准：将大化小，逐段分析，制成两套肽片段，找出重合位点，排出肽前后位置，最终确定蛋白质完整序列。;因为羰基碳-氧双键靠拢，允许存在共振结构（resonancestructure），碳与氮之间肽键有个别双键性质，由CO-NH组成肽单元展现相正确刚性和平面化，肽键中4个原子和它相邻两个α-碳原子多处于同一个平面上。;1.蛋白质二级结构;3)R侧链基团伸向螺旋外侧。;（2）β-折叠结构（β-pleatedsheet）;（3）β-转角（β-turn）;（4）自由回转;3.蛋白质三级结构;共价键;肌红蛋白是1957年由JohnKendrew用X射线晶体分析法测定有三维结构第一个蛋白质。它是经典球形蛋白质，高度折叠成紧密结构，疏水氨基酸残基大个别埋藏在分子内部，极性残基在表面。肌红蛋白中有8条α-螺旋。由多肽折叠形成疏水空隙内是血红素辅基，经过肽链上His残基与肌红蛋白分子内部相连，它对肌红蛋白生物活性是必需（与O2结合）。;六、蛋白质分子结构与功效关系;镰状细胞贫血（sick-cellanemia）

从患者红细胞中判定出特异镰刀型或月牙型细胞。;（二）蛋白质构象与功效关系;;七、蛋白质性质;蛋白质分子量（M）与沉降系数（s）关系;（二）蛋白质两性电离及等电点;（2）凝胶电泳：用凝胶（淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺）作支持物。;等电聚焦电泳：当蛋白质在其等电点时，净电荷为零，在电场中不再移动。;（三）蛋白质胶体性质;（四）蛋白质沉淀反应;（五）蛋白质变性;反应名称

;六、蛋白质分类;2.分子组成;（7）成盐反应;（9）成酯反应;（11）成酰胺反应;（13）迭氮反应;本章较全方面地介绍了蛋白质化学基础知识，重点阐述了氨基酸和蛋白质结构、性质和功效间依存关系。在学习氨基酸结构时应联络有机化学羧酸结构，在学习氨基酸化学性质时应联络氨基酸结构，再将氨基酸结构和特征与蛋白质结构和特征联络起来。认识蛋白质主要生物学意义。;组成蛋白质结构单元分子;蛋白质化学专业知识讲座;蛋白质化学专业知识讲座;蛋白质化学专业知识讲座;蛋白质一级结构测定;蛋白质测序主要方法;氨基酸组成测定：;肽段氨基酸测序