酶细胞原生质体固定化.ppt

*2.固定化微生物细胞制造微生物传感器呼吸活性测定型电极活性测定型第95页,共109页，星期六，2024年，5月*三、植物细胞固定化提高存活率和稳定性不容易聚集成团更换培养液反复使用，连续使用易于料液分离（一）固定化植物细胞的特点第96页,共109页，星期六，2024年，5月*三、植物细胞固定化吸附法：泡沫塑料、中空纤维包埋法：多孔凝胶（二）植物细胞固定化的方法第97页,共109页，星期六，2024年，5月*三、植物细胞固定化（三）固定化植物细胞的应用第98页,共109页，星期六，2024年，5月*第99页,共109页，星期六，2024年，5月*四、动物细胞固定化提高细胞存活率提高产率反复使用，连续使用易于料液分离（一）固定化动物细胞的特点第100页,共109页，星期六，2024年，5月*四、动物细胞固定化吸附法：转瓶、微载体、中空纤维包埋法：凝胶包埋、半透膜包埋（二）动物细胞固定化方法第101页,共109页，星期六，2024年，5月*四、动物细胞固定化（三）固定化动物细胞的应用第102页,共109页，星期六，2024年，5月*第三节原生质体固定化(1)固定化原生质体去除了细胞壁的扩散障碍，有利于氧的传递，营养成分的吸收和胞内产物的分泌。(2)原生质体不稳定，容易破裂，固定化后，由于载体的保护作用，稳定性提高。第103页,共109页，星期六，2024年，5月*一、原生质体的制备除去细胞壁所使用的酶根据细胞壁的主要成分不同而进行选择。第104页,共109页，星期六，2024年，5月*二、原生质体固定化

——凝胶包埋法琼脂-多孔醋酸纤维素固定化法海藻酸钙凝胶固定化法角叉菜胶固定化法光交联树脂固定化法第105页,共109页，星期六，2024年，5月*（1）琼脂多孔醋酸纤维固定法用生理盐水配制3％一4％的琼脂，加热，溶解，灭菌后冷至50℃左右，勺等体积一定浓度的原生质体混合，将混合液滴加于多孔醋酸纤维上，置冰箱冷却凝固。（2）海藻酸钙凝胶固定法以3％一6％海藻酸钙溶液与等体积—定浓度的原生质体混合，混合液滴入CaCl2溶液中，并浸泡1—2h。即成。二、原生质体固定化第106页,共109页，星期六，2024年，5月*（3）角叉菜胶固定法配制1％一8％角叉菜胶．加热溶解，灭菌后，冷却至50℃左右，与等体积原生质体混合，混合液滴入一定浓度的预冷KCl中，即得球状固定化原生质体。（4）光交联树脂固定法配制30％一60％浓度的光交联树脂预聚体．加热溶解后，在50℃左右加人1％光敏刘与等体积的原生质体混合后，摊成薄层经紫外光照射，聚合后形成小块，制成片状的固定化原生质体。固定化原生质体用于生产各种氨基酸、酶和生物碱等物质以及甾体转化等。第107页,共109页，星期六，2024年，5月*三、固定化原生质体的特点有利于胞内物质的分泌稳定性好有利于产物的分离纯化添加渗透压稳定剂第108页,共109页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第109页,共109页，星期六，2024年，5月*********************************1、固定化酶在工业生产中的应用(1)氨基酰化酶Aminoacylase首例，1969年，日本田边制药公司，DEAE-葡聚糖凝胶固定化酶,拆分DL-乙酰氨基酸，连续生产L-aa，成本降低40%左右。乙酰-DL—AlaL—Ala+乙酸 乙酰-D—Ala第63页,共109页，星期六，2024年，5月*泵储罐反应产物离心机消旋反应器固定化酶柱子晶体L-AlaL-AlaA-D-AlaA-L-AlaA-D-Ala第64页,共109页，星期六，2024年，5月*(2)葡萄糖异构酶世界上生产规模最大。热处理法进行固定化。1973年，已用于工业化生产。国内外广泛研究和应用。1、固定化酶在工业生产中的应用第65页,共109页，星期六，2024年，5月*(3)天冬氨酸酶1973年，日本，聚丙烯酰胺凝胶为载体固定化具高活力天冬氨酸酶的大肠杆菌，采用包埋法，将延胡索酸转化成L-天冬氨酸。1978年，角叉菜胶固定化纯酶，离子键结合法。1、固定化酶在工业生产中的应用第66页,共109页，星期六，2024年，5月*(4)青霉素酰化酶1973年，催化青霉素或头孢菌素水解6-氨基青霉烷酸(6-APA）或7-氨基头孢霉烷酸(7-ACA),也可催化6-APA或7