真菌杀虫剂液体基质培养基蜂巢式发酵技术的制作方法.pdf

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真菌杀虫剂液体基质培养基蜂巢式发酵技术的制作方法

专利名称:真菌杀虫剂液体基质培养基蜂巢式发酵技术的制

作方法

所属领域本发明涉及一种真菌类生物杀虫剂的发酵技术和

设备,属于生物发酵工程技术领域。

技术背境真菌类生物杀虫剂已成为当前国内外生物农药开

发的热点,近年来国外已有近50个品种登记注册。我国从“六

五”计划开始,一直列为国家科技开发的重点项目。在产品

品种,生产技术和应用技术上开展了大量的研究和开发。现

已开发的菌种已超过一百余种,实验和防治面积已达3000

多万亩,部分产品已列入农业部重点推广的生物农药。在生

产技术上也进行了多种发酵工艺的尝试,但是到目前为止还

没有一项产品实现实际意义上的工业化生产。其主要原因在

于现已开发的生产技术均未摆脱以麸皮、米糠等固体基质培

养基为主的传统固态发酵工艺范畴,由于受到固体基质材料

体积大、质量不稳定,生产过程中工艺复杂、容易被污染、

分离提纯困难等因素的限制,因此产量低、质量差、纯度不

高,很难实现机械化、自动化生产。目前均处于小规模作坊

式的生产状态,无法适应工业化大规模生产的需要。

发明内容

本发明是根据真菌类活性孢子的生长特性,采用光、机、电

一体化的工程原理与生物发酵技术相结合,发明的一种适用

于高纯度、高毒力、批量化生产的真菌杀虫剂发酵技术和成

套设备。本发明采用液体基质培养基、蜂巢式发酵板与专用

自动生产流水线及相关设备相结合,克服了固体基质培养基

发酵工艺所存在的问题,为真菌类生物杀虫剂工业化生产提

供了一种全新的工业化生产技术和相关设备。

本发明的主要内容包括;1.蜂巢式发酵板。其特征在于结构

和形状类似于蜂巢,其平面是由直径1cm±0.3cm,深

2cm±0.5cm的六角形或矩形、圆形孔排列组成。

2.液体基质培养基。其特征在于培养基中含水量在60%以上,

并通过加入增稠剂和凝固胶,使培养基在温度下降到适当程

度时,能够在蜂巢式发酵板的内壁和表面凝结为一层

1.5mm±0.5mm的固态培养基凝胶膜。

3.蜂巢式发酵架。其特征在于由多格、多层金属架构成,一

般为三到四格,每格可插入蜂巢式发酵板50-60张。

4.专用自动生产流水线。其特征在于具有发酵板清洗、灭菌、

培养基涂敷、接种、孢子分离、叠片、分片、将发酵板装入

发酵架和取出发酵架等功能。

5.发酵架自动转运系统。其特征在于由导轨、小车、自动控

制系统组成,具有将发酵架从流水线出口送至发酵室内和从

发酵室内取出送至流水线入口的功能。

6.遂道式发酵室。其特征在于两端具有进、出自动开闭门,

并设有控温、控湿、通气装置。

本发明具体实施方法如下1.根据生产规模将菌种经斜面、摇

瓶、菌种罐等常规液态菌种发酵工艺培养到生产所需数量,

通过气压和密闭管道,将菌种由菌种罐输送到生产线菌种储

存箱内。

2.在配制好碳源、氮源的培养基中加入增稠剂和胶凝剂,使

培养基在40℃±5℃时能迅速凝结。本发明中试配方为蚕蛹

粉3%、白砂糖5%、黄原胶4‰,琼脂6‰。将配置好的原

料放入搅拌式灭菌罐内,采用湿热灭菌法完成拌料和灭菌后,

待温度下降至50℃度时,通过密闭管道输送到生产线培养基

保温储存箱内。

3.发酵板经冲洗、灭菌、干燥后,将培养基通过喷淋或浸沾

的方式,使整个蜂巢式发酵板表面和巢孔内壁上形成

1.5mm±0.5mm左右的培养基凝胶膜,温度下降至30℃以下

后,将液态菌种均匀地喷涂于蜂巢式发酵板培养基膜表面,

依次将发酵板插入发酵架,然后送入发酵室发酵。

4.保持发酵室内温度20℃-28℃,相对温度95%,送入洁净

空气。通过控制通气量的大小调节发酵室内湿度,以满足发

酵过程中菌丝萌发、生长、结孢、成熟各阶段对湿度的需要。

5.孢子成熟后,将发酵板取出,用高压气流将附着于发酵板

上的孢子与发酵板分离并送入集孢器内。发酵板经冲洗,灭

菌、干燥后进入下一个生产过程。

采用该生产技术和设备具有以下优点1.自动化程度高,产量

大。从原材料投入开始到孢子粉回收的全部生产过程均采用

自动化的生产流水线完成,一条生产线日产量可达折算为含

量1000亿/克孢子的白僵菌80-160公斤。

2.产品质量稳定,活孢率高,毒力强、纯度高。采用该工艺

生产的白僵菌每克含孢量达1800亿,活孢率达95%,毒力

大大高于固体基质培养基生产的产品。

3.培养基配料和灭菌均在拌料罐内一次完成,通过密闭管道

输送到生产线。灭菌效果好、不易污染。发酵后不需要干燥

和粉碎,通过气流分离即可获得高纯度孢子粉,减少了生产

技术的难度和复杂性,降低了劳动强度。

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