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布鲁氏菌耐药基因
布鲁氏菌是一种革兰氏阴性嗜氧菌,属兼性细胞内寄生菌,它引起的布鲁氏菌病是一种人兽共患病,畜类布鲁氏菌病主要症状为母畜流产、公畜睾丸炎,人类感染布鲁氏菌主要表现为长期反复的波状热、乏力、多汗、肌肉和关节疼痛等。自1887年首次从死于“马耳他热”的英国士兵的脾脏中分离到布鲁氏菌以来[1],经100多年的研究,共有12种布鲁氏菌被发现[2]。目前布鲁氏菌病仍是中国主要的公共卫生问题之一[3],根据我国疾病预防控制局()发布的数据显示,2017-2021年中国人间布鲁氏菌病的发病率分别是2.79/10万、2.73/10万、3.15/10万、3.36/10万、4.91/10万,整体呈现上升趋势,发病率的上升给我国公共卫生、畜牧业、社会经济发展带来负担。人布鲁氏菌病的一线治疗方案是多西环素联合利福平或链霉素,效果不理想或存在禁忌时,可采用多西环素与复方新诺明或妥布霉素联合用药,或喹诺酮类联合利福平作为二线治疗方案[4]。但随着抗菌药物的使用,布鲁氏菌出现耐药,给临床治疗带来挑战,因此了解其耐药性和机制对改善患者预后极其重要。
分析2013-2022年有关动物源、人源布鲁氏菌耐药性研究的文献及数据发现:动物源布鲁氏菌监测的动物对象以牛、羊为主,极少数篇目未注明布鲁氏菌种类[5],大多数篇目都是关于羊种、牛种布鲁氏菌;人源布鲁氏菌的种类绝大多数是羊种。本文就2013-2022年发表的关于牛羊源布鲁氏菌(主要为羊、牛种)和人源布鲁氏菌(主要为羊种)耐药性与耐药机制研究进展作一综述。
1不同来源的布鲁氏菌耐药性
1.1来自牛羊的菌株
通过分析近10年发表的牛源、羊源布鲁氏菌耐药监测结果(表1)发现,全球多地牛羊源布鲁氏菌耐药现象都较为严重,南非甚至出现耐药性强、耐药谱广的现象,对利福平、阿莫西林、氨苄西林、青霉素G、红霉素的耐药率甚至达到100%,这可能和上述药物在当地使用时间较长,应用范围较广有关。对多西环素、四环素的耐药情况各地区有差异,埃及、中国新疆、伊朗德黑兰的牛羊源布鲁氏菌以及土耳其羊源布鲁氏菌对四环素的耐药率小于30%,中国新疆、伊朗德黑兰、吉尔吉斯斯坦牛羊源布鲁氏菌对多西环素的耐药率小于30%,而南非牛羊源布鲁氏菌对多西环素耐药率大于70%,对四环素耐药率大于30%,且南非、埃及、土耳其牛羊源布鲁氏菌均存在多药耐药的情况。
表1?牛源、羊源布鲁氏菌的耐药性Tab.1?Antimicrobialresistanceof?Brucella?fromcattleandsheep
Manafe等[5]收集南非地区牛、山羊、绵羊源的123株布鲁氏菌进行耐药分析,发现牛羊源布鲁氏菌对利福平、阿莫西林、多西环素、四环素、青霉素G、头孢克肟、红霉素的耐药趋势大致相同,总体耐药情况都比较严峻。对于复方新诺明、头孢西丁牛源的耐药水平明显高于羊源。这种现象表明,同一地区不同种类动物宿主所分离得到的布鲁氏菌药物敏感性各不相同,可能是由于不同动物使用抗菌药物种类和剂量不同所致。
Khan等[11]埃及的研究人员对收集自牛、羊的29株布鲁氏菌进行了药敏检测,结果显示羊种布鲁氏菌(21株)环丙沙星、红霉素、亚胺培南、利福平的耐药率为76.2%、19%、76.2%、76.2%,而牛种布鲁氏菌(8株)对环丙沙星、红霉素、亚胺培南、利福平的耐药率为25%、87.5%、25%、37.5%,提示同一地区不同种布鲁氏菌的抗菌素耐药率有显著差异,该研究团队在所有利福平耐药株中均检测出利福平抗性基因(rpoB)突变,在4株羊种布鲁氏菌的环丙沙星耐药株中检测出gyrA和gyrB基因的喹诺酮耐药区点突变。
1.2来自临床的菌株
在布鲁氏菌病治疗中,布鲁氏菌耐药性检测具有重要意义,但由于具备操作布鲁氏菌的三级生物安全实验室单位少,所以布鲁氏菌耐药检测开展少。1986年Jurica等[12]首次报告了多西环素、利福平双联治疗羊种布鲁氏菌患者期间出现利福平耐药,该团队从患者首次治疗前的血培养中分离出的布鲁氏菌对6种抗生素都敏感(利福平MIC=1.0mg/L),使用双联抗感染6周后停药。在停药3个月后,患者再次出现关节痛症状,此次血培养分离出的布鲁氏菌对利福平耐药(MIC=64mg/L),后用多西环素联合奈替米星联合治愈了该患者。
表2?人源布鲁氏菌的耐药性Tab.2?Antimicrobialresistanceof?Brucella?fromhumans
通过分析人源布鲁氏菌的耐药性(表2),对比牛羊源、人源布鲁氏菌的耐药性,发现后者耐药性明显减弱,对于抗菌药物的耐药率多小于30%。人源布鲁氏菌对利福平
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