生物制药的基本技术专家讲座.pptxVIP

第三章生物制药基本技术

Chapter3BasicTechniqueForBiopharmacon

;生物制药是把生物体内含有生物活性基本物质，保持原来结构和功效，又能在含有各种物质液相或固相中较高纯度分离出来。它是一项严格、细致、复杂工艺过程，包括物理、化学、生物学、工程等方面知识和操作技术。

1.中心问题：

（1）、标准化方法？标准化包含制订标准和落实标准全部过程

（2）、怎样发觉或研制新药？

对于一个新研制生物药品，从查阅文件开始，到探索试验、条件考查（统计客观）、总结制订工艺规程、制订分析判定方法，再进行中试放大，全方面考查工艺是否成熟，是否稳定等。;1、提取法(Extraction)

2、发酵法（Zymotechnics）

3、化学合成（Chemicalsynthesize）

4、组织培养法（Tissueculture）

5、当代生物技术(ModernBiotechnics):

Geneengineering,Enzymeengineering,

Cellengineering,proteinEngineering,

Fermentationengineering;3.生化制药六个阶段

1.原料选择和预处理

2.原料粉碎

3.提取：从原料中经溶剂分离有效成份，制成粗品工

艺过程。

4.纯化：粗制品经盐析、有机溶剂沉淀、吸附、层析、

透析、超离心、膜分离、结晶等步骤进行精制工艺

过程。

5.浓缩、干燥及保留

6.制剂：原料药（精制品）经精细加工制成片剂、针

剂、冻干剂、粉剂等供临床应用各种剂型。;一.RawMaterialSelectingandPretreatment

原料选择和预处理、保留;预处理方法：

1、动物组织先要剔除结缔组织、脂肪组织等非活性部分；植物种子去壳除脂；微生物要进行菌体与发酵液分离等基本操作。便于贮存和运输。

2、冷冻法预处理：有些材料要冷冻保留或低温保留，方便抑制微生物和酶作用。

3、有机溶剂除去部分水分：用丙酮或乙醇进行脱水和脱脂，有利于贮存。;保留;二、原料粉碎ComminutionofRawMaterial;1.机械法：组织捣碎机、匀浆器、研钵、球磨机、万能粉碎机、绞肉机、击碎机、刨片机。

动物组织多在冰冻状态绞碎、溶浆。

2.物理法

A、重复冻融法：把待破碎样品冷至-20℃-15℃，使

之凝固，然后迟缓溶解???如此重复操作，大部分动物性

细胞及细胞内颗粒能够破碎。

B、冷热交替法：将材料投入沸水中，在90℃左右维持数

分钟，马上置于冰浴中，使之快速冷却，绝大部分细胞

被破坏。此法多用于细菌或病毒中提取蛋白和核酸。;C、超声波处理法：多用于微生物材料，处理效果与

样品浓度、使用频率有关。用大肠杆菌制备各种酶

时，惯用50~100mg/L菌体浓度，在1~10KC频率下

处理10~15min。操作时注意防止溶液中气泡存在。

D、加压破碎法：加气压或水压，达0.59~34.32MPa

(210~350kgf/cm2)压力时，可使90%以上细胞被

压碎。多用于微生物酶制剂工业制备。;3.生化及化学法：

A.自溶法：将新鲜生物材料存放在一定pH和适当温度下，利用组织细胞中本身酶系将细胞破坏，使细胞内含物释放出来方法。自溶温度，动物材料在0-4℃，微生物在室温下。自溶时，需加少许防腐剂，甲苯、氯仿，以预防外界细菌污染。

*因为自溶时间较长，不易控制，故制造含有活性核酸和蛋白质时比较少用。;B.溶菌酶处理法：溶菌酶是专一地破坏细菌细胞壁酶。多用于微生物，如蜗牛酶、纤维酶，植物细胞也适用。如用噬菌体感染大肠杆菌细胞制造DNA时，采取pH8.00.1mol/LTris-0.01mol/LEDTA制成2亿/ml细胞悬液，然后加入100μg~1mg溶菌酶，在37°C保温10min，细菌胞壁即被破坏。

C.表面活性剂处理法：表面活性剂分子中，兼有亲脂性和亲水性基团，能降低水界面张力，含有乳化、分散、增溶作用。惯用有：SDS、氯化十二烷基吡啶、去氧胆酸钠。;三、提取Extraction;3、温度：普通在5℃以下，但对温度耐受力较大药品，可适当提升温