GB∕T 18936-2020 高致病性禽流感诊断技术.docxVIP

ICS11.220B41

中华人民共和国国家标准

GB／T18936—2020代替GB/T18936—2003

高致病性禽流感诊断技术

Diagnostictechniquesforhighlypathogenicavianinfluenza

2020-12-14发布2020-12-14实施

国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

发布

GB／T18936—2020

目次

前言 Ⅰ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4临床诊断 2

5样品采集、保存与运输 2

6病毒分离与鉴定 3

7血凝和血凝抑制试验 3

8禽流感病毒RT-PCR试验 4

9禽流感病毒实时荧光RT-PCR试验 5

10综合判定 6

附录A（规范性附录）试验所用溶液和1%鸡红细胞的配制 7

附录B（资料性附录）高致病性禽流感病毒IVPI测定试验 8

附录C（资料性附录）血清非特异性凝集和非特异性抑制因子的处理方法 10

附录D（资料性附录）禽流感病毒RT-PCR试验用引物 12

附录E（资料性附录）RT-PCR反应液配制 13

附录F（资料性附录）实时荧光RT-PCR引物探针序列及反应液配方 14

GB／T18936—2020

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准代替GB/T18936—2003《高致病性禽流感诊断技术》，与GB/T18936—2003相比，主要技术变化如下：

—增加了禽流感病毒RT-PCR试验（见第8章）；

—增加了禽流感病毒实时荧光RT-PCR试验（见第9章）；

—删除了琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验（见2003年版的第4章）；

—删除了间接酶联免疫吸附试验(ELISA)（见2003年版的第5章）。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。

本标准起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中华人民共和国北京海关、中国动物卫生与

1

GB／T18936—2020

高致病性禽流感诊断技术

1范围

本标准规定了高致病性禽流感临床诊断，样品采集、保存与运输，病毒分离与鉴定，血凝和血凝抑制试验，禽流感病毒RT-PCR试验和禽流感病毒实时荧光RT-PCR试验的技术要求。

本标准适用于高致病性禽流感的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T765高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

高致病性禽流感highlypathogenicavianinfluenza；HPAI

由正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的以禽类为主的急性传染病。3.2

血凝hemagglutinin；HA

流感病毒颗粒表面的血凝素蛋白，具有识别红细胞表面受体并使红细胞凝集的特性。3.3

血凝抑制hemagglutinininhibition；HI

抗体特异性地附着在HA分子的抗原位点上，干扰流感病毒HA与红细胞受体之间的结合，抑制了流感病毒HA凝集红细胞的能力。

3.4

反转录聚合酶链式反应reversetranscription-polymerasechainreaction；RT-PCR

一种用于放大扩增特定的RNA片段的分子生物学技术。先用RNA反转录为cDNA,然后以cDNA为模板进行PCR扩增的过程。

3.5

实时荧光RT-PCRreal-timeRT-PCR

利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程的一种扩增核酸方法。3.6

Ct值cyclet