SN∕T 4848.2-2017 出口蜂蜜中常见蜜源植物成分的检测方法实时荧光PCR法 第2部分：油菜.docxVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T4848.2—2017

出口蜂蜜中常见蜜源植物成分的检测方法实时荧光PCR法第2部分：油菜

Identificationofcommonhoneyplantspeciesinexporthoney—Real-timePCRmethod—Part2:Canola

2017-07-21发布2018-03-01实施

中、华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

I

SN/T4848.2—2017

前言

SN/T4848《出口蜂蜜中常见蜜源植物成分的检测方法实时荧光PCR法》共分为8个部分：——第1部分：荆条；

——第2部分：油菜；——第3部分：洋槐；——第4部分：桉树——第5部分：椴树 第6部分：龙眼：

——第7部分：荔枝和龙眼；——第8部分：紫云英。

本部分为SN/T4848的第2部分。

本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本部分主要起草人：吴亚君、陈颖、刘鸣畅、杨艳歌、张九凯、韩建勋、王斌、李想、黄文胜。

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SN/T4848.2—2017

出口蜂蜜中常见蜜源植物成分的检测方法实时荧光PCR法第2部分：油菜

1范围

SN/T4848的本部分规定了出口蜂蜜中油菜成分的实时荧光PCR检测方法。

本部分适用于出口蜂蜜中油菜成分的定性检测。本部分所规定方法的最低检出限(LOD)为0.1%(质量百分比)。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方怯

GB14963—2011食品安全国家标准蜂蜜

GB/T27403—2018实验室质量控制规范食品分子生物学检测

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

蜂蜜honey

蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物混合盾，经充分酿造而成的天然甜物质。

3.2

油菜canola

油菜(BrassicacampestrisL.)又名油白菜、苦菜，十宇花科、芸墓属植物，属十字花科白菜变种。

3.3

实时荧光PCRrealtimePCR

在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程，实现对起始模板的定量及定性分析。

3.4

Ct值cyclethreshold

每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonuleicacid)

PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)

dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxyribonuleosidetriphosphate)

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SN/T4848.2—2017

dATP:脱氧腺苷三磷酸(deoxyadenosinetriphosphate)

dCTP:脱氧胞苷三磷酸(deoxycytidinetriphosphate)

dGTP:脱氧鸟苷三磷酸(deoxyguanosinetriphosphate)

dTTP:脱氧胸苷三磷酸(deoxythymidinetriphosphate)

UNG:尿嘧啶N-糖基化酶(uracilN-glycosylase)

CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrithylammoniumbromide)

Tris:三羟甲基氨基甲烷[Tris(Hydroxymethyl)aminomethane]

EDTA:乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraaceticacid)

Taq:水生栖热菌(Thermusaquaticus)

OD:光度密度(opticaldensity)

FAM:羧基荧光素(Carboxyfluorescein)

TAMRA:羧基四甲基罗丹明(Carboxy-tetramethyl-rhodamine)

BHQ1:黑洞猝灭基团1(Blackholequencher1)

5方法提要

提取样品DNA,以油菜来源DNA为阳