枸杞中维生素 C 和 2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸（AA-2βG）的测定 高效液相色谱法.pdf

枸杞中维生素C和2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸

（AA-2βG）的测定高效液相色谱法

1范围

本文件规定了枸杞及枸杞原浆中维生素C和2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸含量的高效

液相色谱测定方法。

本文件适用于枸杞及枸杞原浆中维生素C和2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸含量的测定；

其他枸杞制品中维生素C和2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸含量可参考本标准进行测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适

用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中的维生素C和2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸经2.0%偏磷酸溶液在酸性条件下提

取，用高效液相色谱法测定，外标法定量。

5试剂与材料

除另有说明外，在分析中使用分析纯试剂和GB/T6682中规定的一级水。

5.1甲醇（CHOH）：色谱纯。

3

5.2磷酸(HPO)：优级纯，85%。

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5.3四丁基溴化铵(C16H36BrN)：分析纯。

5.4偏磷酸(HOP)：分析纯。

3

5.520%甲醇溶液：量取200mL甲醇，用水定容至1000mL。

5.620mmol/L磷酸溶液：准确量取1.4mL磷酸，加水稀释至1000mL后，混匀，⽤0.45µm

滤膜过滤，备用。

5.75mmol/L四丁基溴化铵溶液：准确称取1.61g四丁基溴化铵，用水溶解并定容至1000mL

容量瓶中，⽤0.45µm滤膜过滤，备用。

5.82.0%偏磷酸溶液：准确称取2.0g偏磷酸，用水溶解并稀释至100mL，混匀，备用。

5.9标准品维生素C(VitaminC，CAS号50-81-7)、2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸

2

(2-o-β-D-Glucopyranosyl-L-ascorbicacid，CAS号562043-82-7)，纯度≥95.0%或经国家认

证并授予标准物质证书的标准物质。

5.10标准品储备溶液

分别精密称取维生素C、2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸标准品10mg（精确至0.01mg）

于10mL容量瓶中，加2.0%偏磷酸溶液（5.8）溶解并定容，分别配置成1000μg/mL的标

准品储备溶液，贮存于密闭棕色容量瓶中，于4℃下储存。

5.11混合标准储备溶液

分别吸取维生素C和2-o-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸标准品储备溶液适量，用2.0%偏磷

酸溶液（5.8）稀释成400μg/mL的混合标准储备溶液，贮存于密闭棕色容量瓶中，于4℃下

储存。

5.120.45μm滤膜，有机相。

5.130.45μm滤膜，水相。

6仪器与设备

6.1高效液相色谱仪，配有DAD检测器。

6.2分析天平，感量0.00001g。

6.3涡旋混合器。

6.4超纯水机。

6.5粉碎机，转速为12000r/min。

6.6超声波清洗器。

7试样制备

7.1试样前处理

枸杞样品于-18℃冷冻冰箱中保存。试验时将枸杞样品取出，用高速万能粉碎机（可加

少量的液氮）粉碎（30g样品粉碎时间为30s），分别置于样品瓶中，-18℃冷冻备用。

7.2试样提取

准确称取试样0.25g（精确至0.0001g），置具塞锥形瓶中，精密加入2.0%偏磷酸溶液

（5.8）25mL，密塞，称定重量，充分振摇混匀，超声提取20min，放冷，用2.0%偏磷酸

溶液（5.8）补足减失的重量，摇匀，用0.45μm的滤膜（5.13）过滤，取续滤液上机测定。

8测定

3

8.1液相色谱参考条件

色谱柱：C18色