循环肿瘤细胞CTC检测在肺癌中应用.ppt

治疗前和治疗后CTC的数量变化反映疗效大多数患者的CTC数量在第一个化疗疗程后（22天）下降，提示疗效好。TheAnnalsofThoracicSurgeryVolume87,Issue6,June2009,Pages1669-1675

CirculatingTumorCellsinPulmonaryVenousBloodofPrimaryLungCancerPatients鳞癌中periCTC和pvCTC的数量明显高于腺癌NEnglJMed2008;359:366-77.

DetectionofMutationsinEGFRinCirculatingLung-CancerCells1吉非替尼是较好地治疗非小细胞肺癌的靶向药物，但是EGFR的基因型决定了药物的治疗效果。2目前，检测EGFR的基因型需要选取患者的肿瘤组织，找到一种非侵入性的方法检测EGFR迫在眉睫。3验证能否在CTC中检测EGFR的基因型，且与药物疗效相关。背景CTC中EGFR突变与肿瘤组织中EGFR突变的一致性（SARMS方法）CTC中EGFR基因型有17个与肿瘤组织中的一样，准确率为94%，CTC数量与病情进展的关系吉非替尼治疗后CTC数量下降，伴随着疾病进展CTC数量也随之上升。肿瘤大的患者CTC数量比肿瘤小的患者多。CTC数量影像学肿瘤变化检测CTC中EGFR的基因型与组织中检测结果高度符合可以通过CTC来检测非小细胞肺癌患者肿瘤的基因型CTC数量与疾病进展密切相关结论小细胞肺癌患者活检组织及相对应的CTC中的CD56活检组织中的CD56和CTC中的CD56表达具有一致性外周循环肿瘤细胞的异常情况与手术切除的肿瘤细胞具有高度一致性。CTC中的染色体异常分子标记物与疾病的复发和生存密切相关CTC计数CTC的分子特性指示预后辅助检测抗癌药物的反应——作为预测和/或药物动力学生物标志物联合已知的分期因素，获取更精确的预后判断病人是否需要辅助化疗检测癌症复发辅助诊断实时活检——肿瘤的生物学行为阐明预后和预计的分子学特征检测抗药情况——基于获得连续样本的便利性提高对生物过程机制的了解发现并鉴定新治疗靶点CTC的应用：从细胞计数到分子特性FISH分析CTC生物学特性白细胞有两份CEP7（绿色），EGFR（红色）和MET(蓝色)CTC中，EGFR（红色）和MET(蓝色)基因扩增对CTC进行基因表达分析

BIOTECAN宝藤——JJ强生国内首个CELLSEARCH商业实验室CH商业实验室CTC检测样本准备：使用CellSave储存管采集静脉血液标本10ml轻轻颠倒8次，防止凝块样本室温条件(15-30摄氏度)下96小时之内接受处理接受阿霉素治疗的患者给药之后，至少需要等待7天样本溶血及结块不能用于CTC检测！样本处理流程：7.5ml血液采集于CellSave储存管，加入6.5ml缓冲液

离心

CellTracks?AutoPrep?系统自动处理流程

系统自动将被捕获的、经过染色的细胞置入MagNest装置的样本盒中

系统自动分析后得到结果并由操作人员进行最终判读分析结果并出具报告单若患者血液样本中CTC细胞≤cutoff值，我们将附上CTC细胞图；若患者血液样本中CTC细胞≥cutoff值，我们只截取其中五个CTC细胞图作为代表。每周二、周五开始检测，报告将于检测后3个工作日内发送。请注意采血时注意样本保质期（96h），选择合适的采血时间。90%的癌症死于血行转移。Notesareforinternaltraininguseonly*离心后，各个成分被分层分离，由下至上依次是红细胞、中性粒细胞、密度梯度液和单个核细胞（包括淋巴细胞、单核细胞、上皮细胞和肿瘤细胞），最上层是血浆。由于肿瘤细胞可能会移入血浆组分，而且如果不能立即离心会影响各类细胞的分层效果。（ｉｓｏｌａｔｉｏｎｂｙｓｉｚｅｏｆｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ，ＩＳＥＴ)８μｍ孔径的聚碳酸酯膜可使较小的淋巴细胞和中性粒细胞通过，而较大的肿瘤细胞则被阻滞在膜上Notesareforinternaltraininguseonly*Notesareforinternaltraininguseonly*Ig超家族的成员CD56,又称神经细胞粘附因子(neuralcellularadhensionmolecule,NCAM),嗜同种粘附,表达于NK细胞和一种T细胞亚群细胞表面