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喜树根器官培养和抗癌物质生成的研究

喜树碱由于具有显著的抗癌活性而在近年来受到特别的关注。和本课题相关的研究归纳起来有如下几个方面。

第一是应用组织培养技术的种苗快速繁殖。喜树的种苗繁殖的技术比较简单：在有细胞分裂素和生长素的培养基上可以取得侧芽的增殖；在不含细胞分裂素的培养基上培养的小芽条很容易生根形成完整的植株。

第二是愈伤组织培养和次生代谢产物喜树碱的生成的研究。喜树嫩组织在高浓度的生长素或某些细胞分裂素的作用下可以形成多种形态的愈伤组织，这些组织可以通过继代培养增殖或维持。虽然培养条件可以影响愈伤组织的次生物质的产生，但其形成量远远低于天然材料，目前还没有可行的能够显著提高愈伤组织喜树碱生产能力的方法。看来，喜树碱的生成的器官特异性不容易改变。

第三是用转基因的方法将发根农杆菌转化喜树。这个研究已经取得初步的成功，但根据报道的文献资料看，所形成的毛状根的生长增殖速度并不快，喜树碱的含量也没有正常的根的含量高。目前对毛状根的喜树碱生产能力不高的原因还不清楚，但结构上的异常或许是原因之一。可惜的是，目前没有转基因毛状根和正常根的解剖学上的研究资料或比较结果。用转基因的方法将发根农杆菌转化喜树使其产生毛状根是一个比较有潜力的发展思路，由于Ri质粒插入到基因组DNA序列上的位置的难以控制性，因此，多数插入事件难以得到体现，某些插入则影响细胞的正常代谢，包括例如喜树碱的形成等。除了科学的原因之外，人们对转基因产品包括通过转基因手段获得的产品的接受程度还不是很高，由此也形成了对毛状根发展策略的负面影响。

本研究内容和以上的内容虽然有关联但有明显的不同。就我们所知，本研究所进行的离体根的液体悬浮培养未见报道。我们进行了离体根的液体悬浮培养并取得了成功。此外，本研究还发现离体悬浮培养的根中的喜树碱含量比非离体的含量根更高，由此推测离体培养的根可能具有比非离体的根更强的生成喜树碱的能力，或者是由于非离体的根生产的喜树碱向其他器官转移的结果。

和本研究有关的另一个方面是对喜树碱的含量测定方面。现有的文献资料显示，其他研究者均采用高效液相色谱的方法。我们采用的是薄层色谱技术。标准曲线显示，我们的分析方法可以达到99％以上的准确性，得到可以和高效液相色谱相媲美的分析测试结果，但却显著地简化了测试操作过程。

D推荐者情况及对作品的说明

说明：1由推荐者本人填写；

2推荐者必须具有高级专业技术职称，并是与申报作品

相同或相关领域的专家学者或专业技术人员（教研组

集体推荐亦可）；

3推荐者填写此部分，即视为同意推荐；

4推荐者所在单位签章仅被视为对推荐者身份的确认。

推荐者情况

姓名

彭新湘

性别

男

年龄

45

职称

研究员

工作单位

华南农业大学生命科学学院

通讯地址

广州市天河区华南农业大学

生命科学学院

邮政编

510642

单位电话

02085280186

住宅电话

02085281963

推荐者所在

单位签章

（签章）2024

请对申报者申报情况的真实性作出阐述

申请者袁月姗同学从大学第一学期开始即进入植物学实验室，在吴鸿教授的直接指导下开展植物学的实验；进入第二学期后，在吴教授的安排下到植物细胞工程实验室，在杨跃生教授的直接指导下开展喜树的组织培养工作。参加者刘梓璇则是在第六学期才参加该课题的实验工作的。

请对作品的意义技术水平适用范围及推广前景作出您的评价

该作品属于自然科学研究的范畴。该研究针对喜树资源匮乏和临床治疗对喜树碱的需求，应用生物技术和仪器分析的方法，取得了液体培养离体的喜树根的成功并发现离体培养的喜树根具有相对更强的生成喜树碱的能力。该研究的技术水平先进，研究系统完整，取得的成果可推广应用于喜树碱的工业化生产。

其它说明

（无）

推荐者情况

姓名

刘伟

性别

男

年龄

43

职称

教授

工作单位

华南农业大学生命科学学院

通讯地址

广州市天河区华南农业大学生命科学学院

邮编

510642

单位电话

02085288390

住宅电话

02085282300

推荐者所在

单位签章

签章日期2024

请对申报者申报情况的真实性作出阐述

申请者袁月姗是一个思想活跃，做事主动的表现突出的学生。该生在低年级的很早的时间就已经进入实验室，在吴鸿和杨跃生两位教授的指导下开展喜树组织培养和喜树碱的相关测试分析。由于该课题的研究已经开展了3年以上，重要试验经过多次重复确认，因此本人认为该研究结果是可信的。

请对作品的意义技术水平适用范围及推广前景作出您的评价

该论文作品描述了应用组织培养技术培养离体的喜树根和采用仪器分