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生物化学实验报告(1)

实验一糖类的性质实验

糖类的颜色反应

实验目的

了解糖类某些颜色反应的原理。

学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。

颜色反应

α-萘酚反应

原理糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。

器材

试管及试管架，滴管

试剂

莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100mL，贮于棕色瓶内。用前配制。

1％葡萄糖溶液100mL

1％果糖溶液100mL

1％蔗糖溶液100mL

1％淀粉溶液100mL

0.1％糠醛溶液100mL

浓硫酸500mL

实验操作

取5支试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、0.1％糠醛溶液各1mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。倾斜试管，小心地沿试管壁加入浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。观察记录各管颜色。

间苯二酚反应

原理

在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮醣的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。

器材

试管及试管架，滴管

试剂

塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000mL，称取间苯二酚0.05g溶于30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000mL。

1％葡萄糖溶液100mL

1％果糖溶液100mL

1％蔗糖溶液100mL

生物化学实验报告(1)全文共1页，当前为第1页。实验操作

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生物化学实验报告(1)

取3试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5mL。再向3支试管中各加入塞氏试剂5mL，充分混合。将试管同时放入沸水浴中，。观察记录各管颜色。

(二)糖类的还原作用

一、实验目的

1、理解并掌握糖类的还原性质；

2、学习常用的鉴定糖类还原性的方法。

3、了解斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原理。

二、实验原理

还原糖是指含有自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的单糖和某些二糖（如乳糖和麦芽糖）。在碱性溶液中，还原糖能将Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等金属离子还原，而糖本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类的这种性质常被用于糖的定性和定量测定。

三、器材

试管及试管架，水浴锅电炉

四、试剂

1斐林试剂

甲液氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的溶液。乙液硫酸铜的质量分数为0.05g/mL的溶液。

2本尼迪克特试剂

31％葡萄糖溶液100mL

41％果糖溶液100mL

5、1％蔗糖溶液100mL

五实验操作

六思考题

1、斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原理是什么？

2、试比较斐林氏、本尼迪克特试法的方法。

生物化学实验报告(1)全文共2页，当前为第2页。

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生物化学实验报告(1)

实验二总糖的测定---蒽酮比色法

一、实验目的

掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。

二、实验原理

强酸可使糖类脱水生成糠醛，生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在620nm处有最大吸收。在10-100ug范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30ug左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。

三、仪器、试剂和材料

1.仪器

(1)分光光度计

(2)电子顶载天平

(3)三角瓶：50m1X1

(4)大试管：9支

(5)试管架，试管夹

(6)漏斗，漏斗架

(7)容量瓶：50m1X2

(8)刻度吸管：1m1X3，2m1X1，5mlX1

(9)水浴锅

2.试剂

(1)葡萄糖标准液：l00ug/ml

(2)浓硫酸

(3)蒽酮试剂:0.2g蒽酮溶于100ml浓H2SO4中当日配制使用。

3.材料

小麦分蘖节（或者其它材料）。

四、操作步骤

1.葡萄糖标准曲线的制作

取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：

管号

1

2

3

4

5

6

7

葡萄糖标准液（ml）

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.6

0.8

蒸馏水（ml）

1

0.9

0.8

0.7

0.6

0.4

0.2

葡萄糖含量（ug）

0

10

20

30

40

60

80

在