T_CIFST 015-2023 食品中叶酸的测定 预包被微孔板式微生物法.docxVIP

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团体标准

T/CIFST015—2023

食品中叶酸的测定

预包被微孔板式微生物法

Determinationoffolicacidinfoods

pre-coatedmicroplatemicrobiologicalmethod

2023-08-16发布2023-08-16实施

中国食品科学技术学会发布

Ⅰ

T/CIFST015—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

本文件使用了与AOAC官方方法960.46微生物法检测维生素和GB5009.211—2022《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》中一致的菌种,提取方法类似。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国食品科学技术学会提出并归口。

本文件起草单位:广州海关技术中心、南京海关动植物与食品检测中心、拜发分析系统销售(北京)有限公司。

本文件主要起草人:刘津、董洁、高东微、王宇、吕永生、张锐、廖冰君、葛丽花、贺丽丽。

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T/CIFST015—2023

食品中叶酸的测定预包被微孔板式微生物法

1范围

本文件规定了食品中叶酸测定的预包被微孔板式微生物法。

本文件适用于饮料、糖果、调制乳粉、婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品、特殊医学用途配方食品、保健食品、谷物及其制品、蛋类和乳类食品中叶酸含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

叶酸是预包被微孔板中鼠李糖乳杆菌(Lactobacilluscaseispp.rhamnosus,ATCC7469)生长所必需的营养素。在一定控制条件下,在叶酸测定培养基中,鼠李糖乳杆菌的生长与待测试样中叶酸的含量呈线性关系,将吸光度与标准工作曲线进行比较,即可计算出试样中叶酸的含量。

4试剂和材料

4.1试剂

4.1.1预包被微孔板式叶酸微生物法试剂盒(VitaFast?FolicAcid):见附录A。

4.1.2除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682规定的二级水要求。

4.1.3氢氧化钠(NaOH)。

4.1.4鸡胰酶(γ-谷氨酰水解酶)(VitaFast?ChickenPancreatin)。

4.1.5磷酸二氢钠(NaH2PO4)。

4.1.6抗坏血酸钠(C6H7O6Na)。

4.2试剂配制

4.2.11mol/L氢氧化钠:称量4.00g氢氧化钠,加水溶解后,转移至100mL容量瓶中,加水定容至刻度。

4.2.2磷酸盐缓冲液:称量7.80g磷酸二氢钠和1.00g抗坏血酸钠,加水溶解后,转移至1000mL容量瓶中,加水定容至刻度。用1mol/L氢氧化钠调节pH至7.2,现用现配。

4.2.3鸡胰酶液:加入5mL水至鸡胰酶试剂瓶中,混合均匀。可分装保存,每个样品测定使用100μL。

5仪器和设备

5.1水浴锅:95℃±1℃,37℃±1℃。

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5.2恒温培养箱:37℃±1℃。

5.3均质器。

5.4超净工作台。

5.5离心机:≥8000g。

5.6酶标仪:波长610nm~630nm或540nm~550nm。

5.7涡旋混合器。

5.8电子天平:感量0.01g。

5.9微量可调单通道移液器及配套枪头:10μL~100μL、50μL~200μL、100μL~1000μL。

5.10无菌离心管:1.5m