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生物化学-蛋白质化学

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生物化学

蛋白质化学

蛋白质的重要性

蛋白质是机体最丰富的有机分子，占人体重量的16~20%，占干重的45%，肺组织高达80%。

蛋白质的生物学功能：生物催化作用、调节作用〔激素，基因表达调控作用〕、免疫防御与保护作用〔细胞因子、补体、抗体〕、转运和储存作用〔转运蛋白〕、结构功能〔保护和维持细胞、组织、器官的正常生理形态，细胞骨架〕、运动与支撑作用、信息接收传递作用〔受体蛋白〕、生物膜功能

蛋白质组学：蛋白质组指的是基因组编码的全部蛋白质，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质；蛋白质组学本质上指的是在机体整体水平上系统地研究蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平、翻译后的修饰、蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生、细胞代谢等过程的整体而全面的认识。

蛋白质的化学组成

蛋白质含氮量平均为16%，蛋白质的含量=含氮量x6.25。

天然存在的氨基酸约180种，组成蛋白质的氨基酸只有20余种〔根本氨基酸〕。

根本氨基酸的共同特点：①除脯氨酸为α-亚氨基酸外，其他组成蛋白质的根本氨基酸均为α-氨基酸；②除甘氨酸外，其他氨基酸的α-碳原子为手性碳原子，且天然蛋白质中根本氨基酸皆为L-型；③不同的氨基酸的R链不同，对蛋白质的空间结构和理化性质有重要影响。

20种常见氨基酸的名称和结构式〔见书P11〕

氨基酸的分类非极性R基氨基酸：丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸；极性不带电R基氨基酸〔易溶于水〕：甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺；带负电的R基氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸；带正电的R基氨基酸：赖氨酸、组氨酸、精氨酸。

生物化学-蛋白质化学全文共1页，当前为第1页。氨基酸的物理性质：①高熔点，200℃以上，以离子状态存在；②一般均溶于水，溶于强酸、强碱；不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂；③氨基酸一般有味；④除甘氨酸外均有旋光性。

生物化学-蛋白质化学全文共1页，当前为第1页。

氨基酸的化学性质：①两性解离与等电点：pH高于等电点带负电，低于等电点带正电。等电点时主要以两性离子存在，极少量以中性分子存在。中性氨基酸的pI在微酸性围，践行氨基酸的pI在碱性围，酸性氨基酸的pI在酸性围。②紫外吸收性质：色氨酸〔280nm〕、酪氨酸〔275nm〕和苯丙氨酸〔257nm〕含有苯环共轭双键系统，具有紫外吸收特性。③茚三酮反响：与大多数α-氨基酸加热反响产生蓝紫色物质，与脯氨酸、羟脯氨酸反响呈黄色，与天冬酰胺反响呈棕色；④α-羧基的反响：与碱、醇、硼氢化锂反响；⑤R基的反响：Million反响〔Tyr-红色〕、Folin反响〔Tyr-蓝色〕、坂口反响〔Arg-红色〕、Pauly反响〔His、Tyr-橘红色〕、乙醛酸的反响〔Trp-紫红色环〕。

氨基酸的功能：①寡肽、多肽、蛋白质的根本结构单位；②多种生物活性物质的前体；③作为神经递质或神经营养素；④参与生物体的物质代谢和能量代谢。

蛋白质的分子结构

蛋白质的一级结构包括：①组成蛋白质的多肽链的数目；②多肽链的氨基酸顺序；③多肽链或链间二硫键的数目和位置。

体多肽和蛋白质生物合成时，均是从氨基端开始，延长到羧基端终止，因此N末端被定为多肽链的头。

蛋白质一级结构的概念：蛋白质是由不同种类、数量和排列顺序的氨基酸，通过肽键而构成的高分子有机含氮化合物。它是蛋白质作用的特异性、空间结构的差异性和生物学功能多样性的根底。

活性多肽：谷胱甘肽GSH〔复原剂、与毒性药物结合、维持红细胞膜结构的稳定、使巯基酶的活性基团维持复原状态〕、降钙素基因相关肽〔舒血管作用，参与心血管系统调节〕、肽类激素、多肽类抗生素。

生物化学-蛋白质化学全文共2页，当前为第2页。蛋白质的水解反响：①酸水解:6M盐酸或4M硫酸，回流20小时，完全水解；得到L-氨基酸，不引起消旋，色氨酸被破坏，酰胺被水解。②碱水解:5M氢氧化钠，回流10-20小时，完全水解；得到等摩尔D-氨基酸L-氨基酸，引起消旋；色氨酸稳定。③酶水解:不引起消旋，不破坏氨酸酸，但一种酶水解不彻底，需要几种酶协同作用。

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蛋白质一级结构测定的原理与方法：

氨基酸的组成分析：蛋白质样品的纯化→多肽链数目的测定→氨基酸组成的分析。

N端氨基酸的分析：①二硝基氟苯法〔DNFB〕：N末端氨基与DNFB反响，生成DNP多肽衍生物；用酸水解，所有肽键被水解生成相应氨基酸和DNP-末端氨基酸。②二甲氨基萘磺酰氯法〔DNS-Cl〕：DNS-氨基酸有强烈荧光，灵敏度高。DNFB法和DNS法的不足之处是不能在同一个肽链上重复应用。③Edman降解法〔PITC、PTH-氨基酸〕：可标记并仅