高考生物一轮复习复习第十单元第48课基因工程的基本工具和操作程序课件.pptVIP

④PCR技术与体内DNA复制的比较⑤PCR中引物设计应注意的问题a．设计引物的依据：目的基因两端的核苷酸序列。b．引物设计时既要考虑目的基因序列，又要考虑载体序列，原因：为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的5′-端加上限制酶的酶切位点。c．使用的一对引物的序列不相同，因为目的基因两端具有不同的核苷酸序列。d．引物设计的要求(或引物失效的原因)：每种引物内部不能发生局部碱基互补配对；两种引物之间不能在局部发生碱基互补配对。e．每种引物内部不能发生局部碱基互补配对的原因：防止引物自身折叠。f．两种引物之间不能在局部发生碱基互补配对的原因：防止引物之间配对，导致引物不能同模板链结合。g．两种引物都结合在DNA模板链的3′-端；脱氧核苷酸连接在引物的3′-端进行延伸。2．基因表达载体的构建——基因工程的核心(1)目的：使目的基因___________________________________________，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。(2)基因表达载体的组成及作用RNA聚合酶转录在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代3．将目的基因导入受体细胞(1)转化的含义：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。(2)转化的方法类型常用方法常用受体细胞转化过程植物农杆菌转化法、花粉管通道法体细胞将