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泌乳与哺乳绪论**第6讲精液的稀释1.定义在精液中加入一定量按特定配方配制、适宜于精子存活并保持受精能力的稀释液。或:在采得的精液里,添加一定数量的、按特定配方配制的、适宜于精子存活并保持受精能力的溶液。2.稀释的目的:扩大精液容量,提高一次射精的可配母畜头数,降低精液能量消耗,补充适量营养和抑制精液中微生物的活性,延长精子寿命,便于精子保存和运输等。精液的稀释即在采得的精液里,添加一定数量的、按特定配方配制的、适宜于精子存活并保持受精能力的溶液。(一)稀释液的主要成分和作用稀释剂主要用于扩大精液容量,保证稀释液与精液有相同的渗透压。营养剂补充精子在代谢过程中消耗的能源。如卵黄、葡萄糖、果糖、乳糖等。保护剂缓冲物质保持精液的pH值;如柠檬酸钠、磷酸氢二钾等;精液的稀释非电解质和弱电解质降低精清中电解质浓度的作用;如各种糖类和甘氨酸等;防冷物质防止精子冷休克的作用。如卵磷脂;抗冻物质如甘油、DMSO、Tris等;抗菌物质如抗生素类。其他添加剂酶类如消除过氧化氢等有害物质有危害,或促进精子获能;激素类OXT、PG等利于精子运行;维生素类B1、B2、B12等提高精子活力等。稀释液的种类扩容稀释液常温保存稀释液低温保存稀释液冷冻保存稀释液稀释液配制原则各种物质要纯净(化学纯或分析纯)且称量准确;所有物品和用具冼干净和消毒;各种原料溶解后过滤,去除杂质;卵黄、奶类、抗生素用时添加;稀释液的稀释倍数和稀释方法稀释倍数牛通常稀释10-40倍;有时含500万/毫升有效精子数,受胎率不受影响。猪通常稀释2-4倍;羊通常稀释2-4倍,若采精后数小时内使用,便原精输精。因稀释后精液活力下降很快。马、驴通常稀释2-3倍,因稀释后精液活力下降很快,最好原精输精;兔通常稀释3-5倍。稀释液的稀释倍数和稀释方法稀释倍数=精子密度活力每毫升稀释精液中要求有效精子数稀释方法将稀释液与精液置于37℃水浴中保温,当稀释液与精液温度相同后,将稀释液沿杯壁缓缓加入精液中,然后轻轻摇动或用灭菌玻棒搅拌,使之混匀。高倍稀释时,先稀释3-5倍,轻放后再稀释至终浓度,避免环境的突然改变,造成稀释打击。稀释后略等片刻作活力检查,若稀释前后活力一样,再行分装和保存。图片来源于互联网1.保存原理暂时地抑制或停止精子的运动,降低其代谢,达到延长精子存活时间而又不失去受精能力的目的。2.精液保存的目的延长精子的存活时间,扩大精液的使用范围,便于长途运输。第7讲精液的保存和运输3.精液保存的途径降低保存温度控制稀释液的酸度。4.保存方法(按温度)常温保存(15-25℃)低温保存(0-5℃)冷冻保存(-79或-196℃)精液保存的方法(按精液的状态):液态保存:常温保存和低温保存温度都在0℃以上,故称液态精液保存。冷冻保存:超低温保存精液以冻结形式作长期保存,故称冷冻精液保存。(1)常温保存又称室温保存。因不需特殊的控温设备,操作简便,易于普及。公猪精液适于此法保存。原理:利用稀释液所造成的弱酸性环境,延长精子的存活时间。稀释液以糖类、缓冲物质、抗菌物质为主。(2)低温保存将稀释后的精液置于0-5°C环境中,使精子运动完全消失而处于休眠状态,延长其保存时间。稀释液中以卵黄、奶类等作为抗冻保护剂。如最初牛精液用含2.9%柠檬酸钠和20-30%卵黄作为低温保存稀释液,可持续1周左右。(3)精液冷冻保存1.目的:冷冻解决了精液长期保存的问题,使精液不受时间、地域和种畜生命的限制,极大地提高了优良公畜的利用率,加速了品种的育成和改良。对优良种畜在短期进行后裔测定,保留和恢复某一品种或个体优良遗传特性,以及进行血统更新、引种、降低生产成本等方面都有重要意义。2.冷源:液氮(-196℃)或干冰(-79℃)。冷冻保存4.原理:结论:在冷冻精液的制作过程中,否认降温或升温都应快速越过冰晶化温区,使冰晶来不及形成。精子的有害温区(即冰晶化温区):0-60°C精子的最有害温区(即冰晶化最危险温区):-15°C-
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