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动物组织或材料中盐酸克伦特罗残留的快速ELISA检测

试剂盒产地：比利时Bio-X

1.检测原理8.工作液的准备

2.操作时间9.样品前处理

3.检测下限10.酶联免疫实验设计

4.回收率11.操作步骤

5.交叉反应率12.结果计算

6.试剂盒的组成13.结果分析

7．需要设备及试剂14.注意事项

简介：

克伦特罗（Clenbuterol）属于beta兴奋剂，是一种高选择性的兴奋剂和激素，具有水

解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用。进年来被一些人非法添加到饲料中以提

高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物的生长。当用作生长调节剂时，其添加量是治疗量的5—

10倍，常在动物体内残留而给消费者带来危害。

通常，HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法，但是其前处理步骤费用昂贵，而ELISA

快速检测试剂盒因成本低、操作简便、速度快、一次检测样本量大、仪器化低，现已成为常

规的筛选方法。

1.检测原理：

测定的基础是抗原抗体反应。微孔板上包被有针对兔IgG（Clenbuterol抗体）的羊抗

体，含有克伦特罗抗原的样品或标准品与酶标记物被加入到小孔中，经过孵育及洗涤步骤后，

游离的抗原与抗原酶标记物竞争抗体结合位点，没有结合的抗原酶标记物在清洗步骤中被除

去，将显色液加入到孔中并且孵育，结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加

入反应停止液后使颜色由蓝色转为黄色。在450nm处测量，吸光强度与样品的克伦特罗浓度

成反比。

2.操作时间：1小时(30分钟孵育+30分钟显色)

3.检测下限：0.1ppb

4.回收率：

尿样和血清：97-110%

饲料：95-100%

肝脏/组织：90-97%

牛奶及奶粉100%

5.交叉反应率：

Clenbuterol(克伦特罗)100%

Mabuterol（马普特罗）100%

Mapenterol（马喷特罗）100%

Salbutamal(沙丁胺醇)8-9%

Terbutalin(特普他林)7-8%

Simarterol(塞曼特罗)0.1%

Isoproterenol（异丙肾上腺素）0.1%

Fenoterol（非诺特罗）0.1%

6.试剂盒的组成：

1)96孔酶标板：12条╳8孔（包被有抗兔IgG）.

2)克伦特罗标准液6瓶：1ml/瓶，为Clenbuterol水溶液:0.1ng/ml，0.3ng/ml，0.6ng/ml，

1.25ng/ml，2.5ng/ml，5ng/ml.

3)酶联结合物Conjugateperoxidase：6ml黄盖

4)抗Clenbuterol抗体溶液：Anti-clenbuterolantibody11ml红盖

5)冲洗液（需10倍稀释）Washbuffer：50ml塑料瓶

6)柠檬酸盐缓冲液Citratebuffer：25ml蓝盖

7)底物溶液Chromogen：3ml黑盖

8)样品稀释液（需20倍稀释）Diluentsolution:10