血型鉴定交叉配血中若干.ppt

****************************凝聚胺原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用底离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspending），Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene）阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性，但如果红细胞被应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。第31页,共44页，星期六，2024年，5月凝聚胺法1、取3支试管分别标记（主、次、混）2、5%红细胞制备：取25ul样本压积红细胞悬浮于500ul生理盐水中。3、主侧：受血者血浆2滴+5%供血者红细胞1滴。4、次侧：供血者血浆2滴+5%受血者红细胞1滴。5、将主侧管和次侧管所加的所有成分都加入混合管中。6、主侧管、次侧管、混合管中各加入低离子介质溶液600ul,混合均匀，室温放置1分钟。7、再分别向3管中加入凝聚胺溶液2滴混合均匀，室温放置15秒钟。8、置离心机内3400rpm/15秒，倒去上清液，使管底保留约0.1ml的液体。9、目测管内有无红细胞凝集块，若没有凝块，则必须重做。10、向红细胞已发生凝集的试管内加入2滴复悬液，轻轻混匀，显微镜下观察结果（红细胞凝块散开为阴性反应，示血交叉配型相合；若红细胞仍凝集成块为阳性反应，示血交叉配型不合。第32页,共44页，星期六，2024年，5月可引起血清学问题的一些临床疾病DAT阳性类风关多凝集现象细菌感染A/B抗原表达减弱白血病ABO异常卵巢囊肿获得性B抗原细菌感染、结肠癌、肠梗阻Kell血型系统抗原抑制慢性肉芽肿病溶血PNH、红细胞酶缺乏、过度加热温性自身抗体癌、HLE冷性自身抗体冷凝集素疾病、淋巴瘤、梅毒、病毒感染第33页,共44页，星期六，2024年，5月可引起血清学问题的一些临床疾病串钱状凝集多发性骨髓瘤ABO同种抗体缺乏或减弱低（无）丙种球蛋白血症免疫性ABO抗体新生儿、妊辰自身（同种）抗N血液透析病人HLA抗体经产妇、移植病人、多次输血者ABO同种抗体的缺乏或减弱3岁新生儿﹥70岁老年人第34页,共44页，星期六，2024年，5月药物的使用与血型血清学疑难问题假凝集血浆扩张剂串钱状凝集右旋糖酐混合外观红细胞输异型红细胞、骨髓（最近或过去）获得额外抗原同上DAT阳性输注/注射免疫球蛋白意外的同种抗体输注含同种抗体的血浆、