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研究文章
红细胞裂解预处理可显著改善
从血液中提取梅毒螺旋体
DNA
AAAda,b丽丽转换,b,c
Zi‑Han
Wei,
Lin
Xie,
Yong‑Jing
Wang,
Jiang‑Xing
Zhuang,
Jian‑Jun
Niu,
a厦门大学医学院中山医院检验中心,厦门,中国b厦门大学医学院传染病研究所,厦门,中国c厦门市临床检验质量控制中心,厦门,
中国
d厦门大学医学院神经科学研究所,福建省神经退行性疾病与衰老研究重点实验
室,厦门,中国
摘要PCR
可以作为梅毒螺旋体血清学检测的补充。然而,其灵敏度对于血液样本检测并不令人满意。本研究旨在调查
用红细胞
(RBC)
裂解物进行预处理是否可以提高从血液中提取梅毒螺旋体亚种
DNA
的产量。我们开发并验证了一
种定量
PCR
(qPCR)
检测方法,该方法利用
TaqMan
技术通过靶向
polA
基因来特异性检测梅毒螺旋体
DNA。在生
理盐水
(NS)、全血、血浆和血清中制备含有
106至
100
个梅毒螺旋体/mL
的模拟培养基,并对部分全血进行
RBC
裂
解预处理。然后,从
50
只梅毒兔子身上抽取的血液样本被平行分成五组,标记为全血、全血/裂解红细胞、血浆、血清和
血细胞/裂解红细胞。
DNA提取和qPCR检测,比较不同组间的检出率和拷贝数。polA方法线性良好,扩增效率高达102%。在模拟血液样本
中,polA方法的检出限在全血/裂解红细胞、血浆和血清中达到1
102个梅毒螺旋体/mL,而在NS和全血中检出限仅为
1
104个梅毒螺旋体/mL。在梅毒兔血液样本中,全血/裂解红细胞的检出率最好(82.0%),全血的检出率仅为6%。
全血/裂解红细胞的拷贝数高于全血。红细胞裂解预处理可以显著提高全血中梅毒螺旋体DNA的产量,且产量优于全
血、血浆、血清和血细胞/裂解红细胞。
重要性梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病,可扩散到血液中。PCR
可在血液中检测到梅毒螺旋体
DNA,但灵
敏度低。很少有研究将红细胞裂解预处理应用于血液梅毒螺旋体
DNA
的提取。本研究表明,全血/裂解红细胞的检测
限、检出率和拷贝数优于全血、血浆和血清。经过红细胞裂解预处理后,低浓度梅毒螺旋体
DNA
的产量得到提高,基于
血液的梅毒螺旋体
PCR
的低灵敏度得到改善。因此,全血/裂解红细胞是获取血液梅毒螺旋体
DNA
的理想样本。
编辑
Susan
Realegeno,
Quest
Diagnostics
版权所有
©
2023
Wei
等人。这是一篇开放获取的文章,
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